ExpressPlus™聚丙烯酰胺蛋白预制胶，Genscript金斯瑞北京一级代理_skypple

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ExpressPlus™聚丙烯酰胺蛋白预制胶，Genscript金斯瑞北京一级代理

(2015-05-04 07:47:39)

标签：

聚丙烯酰胺预制胶

genscript

金斯瑞

genscript一级代理

分类： Genscript【金斯瑞】

金斯瑞 ExpressPlus™ 预制胶是Express 预制胶的升级版，它的电泳时间更短、上样量更大、转印效率更高，最重要的是，它具有更高的性价比。该预制胶于pH6.4的弱酸性条件下灌注，能够更好地减少聚丙烯酰胺的降解，提高凝胶稳定性和分辨率。

ExpressPlus™预制胶提供不同浓度的梯度胶和固定浓度胶。梯度胶的浓度包括4-20%、4-12%和8-16% ；固定浓度胶包括8%、10%和12%。每种浓度的预制胶都有10孔、12孔和15孔三种规格。胶板尺寸：长×宽×厚为100×85.4×4.7 mm；凝胶尺寸：长×宽×厚为80×70×1 mm。

主要特点：

bis-tris缓冲系统—弱酸性环境，最大限度地减少聚丙烯酰胺的降解，提高凝胶稳定性

简单易用—特殊上样口设计，使用普通10 μl移液枪头快速上样

上样量大—最大上样量可达80 μl, 高于其他公司同类产品

高分辨率—专有的凝胶灌注技术，蛋白条带分离更为清晰和均一

超长保质期—2-8℃可保存12个月

兼容性胶板设计—适合大多数小型电泳槽

物美价廉—免费提供MOPS缓冲液粉末

产品编号名称规格

M42010 ExpressPlus PAGE Gel, 4-20%, 10 wells 1 Box of 10

M42012 ExpressPlus PAGE Gel, 4-20%, 12 wells 1 Box of 10

M42015 ExpressPlus PAGE Gel, 4-20%, 15 wells 1 Box of 10

M81610 ExpressPlus PAGE Gel, 8-16%, 10 wells 1 Box of 10

M81612 ExpressPlus PAGE Gel, 8-16%, 12 wells 1 Box of 10

M81615 ExpressPlus PAGE Gel, 8-16%, 15 wells 1 Box of 10

M01210 ExpressPlus PAGE Gel, 12%, 10 wells 1 Box of 10

M01212 ExpressPlus PAGE Gel, 12%, 12 wells 1 Box of 10

M01215 ExpressPlus PAGE Gel, 12%, 15 wells 1 Box of 10

M01010 ExpressPlus PAGE Gel, 10%, 10 wells 1 Box of 10

M01012 ExpressPlus PAGE Gel, 10%, 12 wells 1 Box of 10

M01115 ExpressPlus PAGE Gel, 10%, 15 wells 1 Box of 10

M00810 ExpressPlus PAGE Gel, 8%, 10 wells 1 Box of 10

M00812 ExpressPlus PAGE Gel, 8%, 12 wells 1 Box of 10

M00815 ExpressPlus PAGE Gel, 8%, 15 wells 1 Box of 10

M41210 ExpressPlus PAGE Gel, 4-12%, 10 wells 1 Box of 10

M41212 ExpressPlus PAGE Gel, 4-12%, 12 wells 1 Box of 10

M41215 ExpressPlus PAGE Gel 4-12% 15 wells 1 Box of 10

MB01015 5X Sample Buffer 5 ml

M00138 MOPS Running Buffer Powder 1 Box (5/PK)

M00139 Transfer Buffer Powder 1 Box (10/PK)

注意事项: 金斯瑞的ExpressPlus™ PAGE Gels适合在1x Bis-Tris buffer (pH 6.8)中电泳。为了得到最好的结果，请配套使用金斯瑞的电泳缓冲液（产品编号M00138）。电泳结束后，配套使用金斯瑞的电转缓冲液（产品编号M00139）来转印蛋白。另外，配置缓冲液时请参考相应的说明书。

蛋白迁移表： 下面的蛋白迁移表可以帮助你选择合适的蛋白胶进行蛋白电泳。如下的电泳图的电泳条件为：电压140V，电泳时间55min，溴酚蓝条带大概在55min左右能跑到胶的最下端。

http://s6/mw690/002dNWYfzy6RZLHO09n45&690

凝胶选择表:

目录号

浓度

孔数

上样体积

电泳缓冲液

转移缓冲液

分离范围

M00810

8%

10

80μl

Tris-MOPS-SDS, MES

Tris-Bicine

180―20 kDa

M01010

10%

10

80μl

Tris-MOPS-SDS, MES

Tris-Bicine

160―10 kDa

M01210

12%

10

80μl

Tris-MOPS-SDS, MES

Tris-Bicine

120―6.5 kDa

M42010

4-20%

10

80μl

Tris-MOPS-SDS, MES

Tris-Bicine

250―10 kDa

M81610

8-16%

10

80μl

Tris-MOPS-SDS, MES

Tris-Bicine

160―10 kDa

M41210

4-12%

10

80μl

Tris-MOPS-SDS, MES

Tris-Bicine

250―20 kDa

M00812

8%

12

60μl

Tris-MOPS-SDS, MES

Tris-Bicine

180―20 kDa

M01012

10%

12

60μl

Tris-MOPS-SDS, MES

Tris-Bicine

160―10 kDa

M01212

12%

12

60μl

Tris-MOPS-SDS, MES

Tris-Bicine

120―6.5 kDa

M42012

4-20%

12

60μl

Tris-MOPS-SDS, MES

Tris-Bicine

250―10 kDa

M81612

8-16%

12

60μl

Tris-MOPS-SDS, MES

Tris-Bicine

160―10 kDa

M41212

4-12%

12

60μl

Tris-MOPS-SDS, MES

Tris-Bicine

250―20 kDa

M00815

8%

15

40μl

Tris-MOPS-SDS, MES

Tris-Bicine

180―20 kDa

M01115

10%

15

40μl

Tris-MOPS-SDS, MES

Tris-Bicine

160―10 kDa

M01215

12%

15

40μl

Tris-MOPS-SDS, MES

Tris-Bicine

120―6.5 kDa

M42015

4-20%

15

40μl

Tris-MOPS-SDS, MES

Tris-Bicine

250―10 kDa

M81615

8-16%

15

40μl

Tris-MOPS-SDS, MES

Tris-Bicine

160―10 kDa

M41215

4-12%

15

40μl

Tris-MOPS-SDS, MES

Tris-Bicine

250―20 kDa

目录号	浓度	孔数	上样体积	电泳缓冲液	转移缓冲液	分离范围
M00810	8%	10	80μl	Tris-MOPS-SDS, MES	Tris-Bicine	180―20 kDa
M01010	10%	10	80μl	Tris-MOPS-SDS, MES	Tris-Bicine	160―10 kDa
M01210	12%	10	80μl	Tris-MOPS-SDS, MES	Tris-Bicine	120―6.5 kDa
M42010	4-20%	10	80μl	Tris-MOPS-SDS, MES	Tris-Bicine	250―10 kDa
M81610	8-16%	10	80μl	Tris-MOPS-SDS, MES	Tris-Bicine	160―10 kDa
M41210	4-12%	10	80μl	Tris-MOPS-SDS, MES	Tris-Bicine	250―20 kDa
M00812	8%	12	60μl	Tris-MOPS-SDS, MES	Tris-Bicine	180―20 kDa
M01012	10%	12	60μl	Tris-MOPS-SDS, MES	Tris-Bicine	160―10 kDa
M01212	12%	12	60μl	Tris-MOPS-SDS, MES	Tris-Bicine	120―6.5 kDa
M42012	4-20%	12	60μl	Tris-MOPS-SDS, MES	Tris-Bicine	250―10 kDa
M81612	8-16%	12	60μl	Tris-MOPS-SDS, MES	Tris-Bicine	160―10 kDa
M41212	4-12%	12	60μl	Tris-MOPS-SDS, MES	Tris-Bicine	250―20 kDa
M00815	8%	15	40μl	Tris-MOPS-SDS, MES	Tris-Bicine	180―20 kDa
M01115	10%	15	40μl	Tris-MOPS-SDS, MES	Tris-Bicine	160―10 kDa
M01215	12%	15	40μl	Tris-MOPS-SDS, MES	Tris-Bicine	120―6.5 kDa
M42015	4-20%	15	40μl	Tris-MOPS-SDS, MES	Tris-Bicine	250―10 kDa
M81615	8-16%	15	40μl	Tris-MOPS-SDS, MES	Tris-Bicine	160―10 kDa
M41215	4-12%	15	40μl	Tris-MOPS-SDS, MES	Tris-Bicine	250―20 kDa

1X MOPS缓冲液配方

SDS-PAGE

Native PAGE

Tris base

6.06 g

6.06 g

MOPS

10.46 g

10.46 g

SDS

1.0 g

--

EDTA

0.3 g

0.3 g

Deionized water

To 1000 ml

To 1000 ml

	SDS-PAGE	Native PAGE
Tris base	6.06 g	6.06 g
MOPS	10.46 g	10.46 g
SDS	1.0 g	--
EDTA	0.3 g	0.3 g
Deionized water	To 1000 ml	To 1000 ml

1X MES缓冲液配方

SDS-PAGE

Native PAGE

Tris base

6.06 g

6.06 g

MES

9.76 g

9.76 g

SDS

1.0 g

--

EDTA

0.3 g

0.3 g

Deionized water

To 1000 ml

To 1000 ml

pH (use 8 M NaOH or 8 M HCl)

7.3

7.3

	SDS-PAGE	Native PAGE
Tris base	6.06 g	6.06 g
MES	9.76 g	9.76 g
SDS	1.0 g	--
EDTA	0.3 g	0.3 g
Deionized water	To 1000 ml	To 1000 ml
pH (use 8 M NaOH or 8 M HCl)	7.3	7.3

5X上样缓冲液配方

SDS-PAGE

Native PAGE

SDS

1.0 g

--

Glycerol

5.0 ml

5.0 ml

Bromophenol Blue

25 mg

25 mg

Tris base

150 mg

150 mg

2-Mercaptoethanol

1.0 ml

1.0 ml (if necessary)

Deionized water

To 10 ml

To 10 ml

pH (use 8 M NaOH or 8 M HCl)

6.8

6.8

	SDS-PAGE	Native PAGE
SDS	1.0 g	--
Glycerol	5.0 ml	5.0 ml
Bromophenol Blue	25 mg	25 mg
Tris base	150 mg	150 mg
2-Mercaptoethanol	1.0 ml	1.0 ml (if necessary)
Deionized water	To 10 ml	To 10 ml
pH (use 8 M NaOH or 8 M HCl)	6.8	6.8

1X转移缓冲液配方

Tris base

3.0 g

Bicine

4.08 g

Deionized water

Reconstitute with 900 ml H₂O,then add 100 ml of methanol or ethanol per bag.

Tris base	3.0 g
Bicine	4.08 g
Deionized water	Reconstitute with 900 ml H₂O,then add 100 ml of methanol or ethanol per bag.

可兼容的电泳槽

GradiGel Mini 4-Cell

IBI Universal Protein System

EC 4-Cell

Hoefer Tall Mighty Small™ (SE 280)

Hoefer Mighty Small™(SE 260/SE 250)

Daiichi Mini 2-Gel & 6-Gel

Owl Road Runner, Penguin

Bio-Rad Mini-PROTEAN^® II & 3

Owl Single Sided Vertical System

Invitrogen Novex XCell I, II, & Surelock^® (Use with GenScript Gel Tank Adapter Plates)

使用说明书: http://www.genscript.com.cn/gsimages/chinese/pdf_0513.gif

示例：

图1：使用金斯瑞的ExpressPlus™预制胶电泳后的蛋白用eStain® 2.0蛋白染色系统染色。

泳道1，15：5 µl NEB蛋白标准（P7703S）

泳道2，5，14：5 µl 大肠杆菌裂解液

泳道3，8，13：5 µl 金斯瑞PAGE-Master蛋白标准（M00516）

泳道4，6，7，12：5 µl 金斯瑞PAGE-Master Plus蛋白标准（MM1397-500）

泳道9，10，11：200 ng，400 ng和800 ng BSA

Stained Pierce Protein Gel for SDS-PAGE, gradient gel example.

http://s2/mw690/002dNWYfzy6RZLMrJTP41&690

图2：G蛋白（金斯瑞，Z02007）用ExpressPlus™预制胶电泳后，Western Blot发光检测。将简易western蛋白标准（金斯瑞，MM0908）于4-20%的ExpressPlus™预制胶中电泳分离，转印到硝酸纤维素膜，然后用10%的无脂牛奶封闭过夜，最后用兔抗蛋白IgG(H&L)(山羊）抗体（Rockland， 611-132-122）检测并用odyssey（LI-COR）扫描。泳道1-5的G蛋白含量分别为200ng，100ng， 50ng， 10ng，5ng。泳道6-10的简易western蛋白标准的量分别为4ul，2ul，1ul，0.5ul，0.25ul。

http://s9/mw690/002dNWYfzy6RZLNyKQo48&690

常见问题

跑完一块胶需要多久？

这取决于胶的浓度和蛋白样品大小，在140V电压下，通常是50分钟；选择高电压可以缩短跑胶时间，但不推荐使用超过180V的电压。

为什么在蛋白转印时凝胶变的很粘？

这是凝胶顶部的积压胶导致的，转印前可切掉顶部带有梳齿部分的凝胶。

过夜脱色会影响条带的锐度吗？

这取决于您的染色条件，我们推荐的过夜脱色条件是：15%乙醇、10%乙酸的水溶液。

如使用eStain，怎样调整ExpressPlus™预制胶的染色时间？

一般情况下，对于高浓度的凝胶，我们推荐1-2分钟的额外处理时间；如您的实验条件比较特殊，我们推荐使用优化过的eStain处理时间。

此预制胶能否用于非变性电泳？

可以，但非变性电泳需要的电泳时间非常长（大约1.5小时），如需使用非变性电泳，请先进行条件优化。

ExpressPlus™预制胶可以用于哪种电泳槽？

只要是用于10 x8 cm预制胶的垂直型电泳槽，ExpressPlus™预制胶都有良好的兼容性。

该预制胶在室温下稳定吗？

ExpressPlus™在室温下可以稳定存放1个月，为取得最佳实验效果，如长时间不用，请冷藏保存。

应该使用什么电泳缓冲液？

我们推荐使用MOPS缓冲液，对于小蛋白，请使用MES缓冲液；请勿使用Tris甘氨酸缓冲液。

疑难解答

问题	可能原因	解决方法
条带弯曲	上样孔或者凝胶与胶板间存在气泡	以注射器或者其他工具用电泳缓冲液冲刷上样孔
指示带变为黄色	胶板破裂，电泳液进入胶中	正确使用电泳槽，确保胶板没有弯曲或破裂
指示带变为黄色	pH值降低	使用新配的电泳缓冲液
条带拖尾	样本难溶或者含有弱电解质（如碳水化合物）	在SDS存在下加热样品，离心后取上清液上样
电泳时间过长	胶带未撕	撕掉胶板下方胶带
电泳时间过长	电泳条件有误	使用固定电压和自动电流，如：140V恒压条件进行电泳
条带分辨率低	胶浓度错误	参照蛋白质迁移表选择合适凝胶
	上样量过载	减少上样量，单孔总蛋白量不超过50 μg
	电泳缓冲液不足，无法降温	外槽的电泳缓冲液增加至与上样孔底部大致齐平，以改善散热
样品条带在凝胶中扩散状	样品含盐类过多	采用透析或者超滤除盐
溴酚蓝前沿附近条带模糊或条带与预期不符	凝胶中离子干扰（分析小分子蛋白时容易出现）	使用MES电泳缓冲液
溴酚蓝前沿附近条带模糊或条带与预期不符	凝胶中离子干扰（分析小分子蛋白时容易出现）	电泳更长时间或者忽略
电压无法达到设定值	电泳时内外槽漏液	使用合适的电泳槽
电压无法达到设定值	样品中其他盐类干扰	使用透析或超滤除盐
凝胶与胶板间出现大量气泡	电泳缓冲液过热	4°C 环境下电泳
凝胶与胶板间出现大量气泡	电泳缓冲液过热	在外槽添加更多的电泳缓冲液
蛋白上样量达不到样品孔的最大体积	上样不够仔细或太快	需比较慢且小心地上样
上样孔内漂浮凝胶	梳齿移出方法错误	垂直并缓慢的移出梳齿

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