2012年江苏省高考试题第27题，涉及到利用血球计数板来计数藻细胞的问题，原题如下：

（3）在实验中需每天定时对藻细胞进行取样计数，请回答以下问题：

①取出的样液中需立即加入固定液，其目的是   维持藻细胞数量不变     ；

②在计数前通常需要将样液稀释，这是因为   藻细胞密度过大     。

③将样液稀释100倍，采用血球计数板（规格为1mm×1mm×0.1mm）计数，观察到的计数室中细胞分布见图3，则培养液中藻细胞的密度是   1×10⁸    个/mL。

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    不少老师对题中的①③两问的答案表示不理解和不会计算，并产生这样的疑问：

    ①在“探究酵母种群数量的动态变化”的实验中，取出的样液中并没有固定，为什么这个实验需要固定？

    酵母菌需计数的是活菌数，为了区分活菌和死菌，利用台盼蓝或亚甲基蓝进行染色。由于活细胞膜的选择透过性，染料不能进入活细胞，因此不被着色的为活菌，被染成蓝色的为死菌，若固定杀死就无法判断活菌和死菌了。但在本题中，为了防止在计数过程中藻细胞继续增殖，采用了固定的方式维持藻细胞数量不变，活细胞刚被固定后仍然为绿色，而原来就死亡的细胞往往已经变黄，容易与刚固定的活细胞区分。

    不过若从取样到计数的时间间隔不长，可以不需要固定直接计数。但是若在野外调查某水体中藻类的数量，回到实验室计数的话，必须取样后立刻固定杀死细胞，维持藻类细胞数目不变，这样获得的数据才更准确。

    ②如何计算图中所示的藻细胞数？

    该血球计数板规格为1mm×1mm×0.1mm，并且是25×16型的，可采用五点取样法，即取四角和最中间的5个中方格（80个小方格）计数，并采取“数上线不数下线，数左线不数右线”的原则处理，共计数了酵母菌20个。计数室共分了400个小方格，其容积共有1mm×1mm×0.1mm=0.1mm³=0.1×10^-3 mL，则1mL有酵母菌20/80×400×10⁴个，再乘以稀释倍数100，结果为10⁸个。

     本题以一个藻类实验的课题为背影材料，考查了对照实验变量的处理、分析曲线得出结论的能力。同时要求学生能把教材实验“探究培养液中酵母种群数量的动态变化”中所涉及到的实验原理、方法进行迁移，灵活运用。