Cellendes 3-D Life是为3D细胞培养专门设计的整合的培养系统。这种水凝胶系统由两种聚合物组成，通过两种聚合物在室温下共价结合交联生成水凝胶，这种化学反应速度快且对细胞无副作用。生成方式操作极其简单，无需额外装置，还可以根据自己的需要在交联前添加生物活性分子，让3D培养满足多变的个性化培育需要。

主要特征包括：

用于生成水凝胶的成分明确；

使用者可控性进行仿生修饰（例如添加肽或蛋白等生物活性成分）；

胶生成和操作简便，可靠，硬度可自行调节；

可改变肽强度和胶的力度，控制细胞的扩散与迁徙；

培养后细胞观测方便，且易收集。

3-D Life Hydrogel系统营造仿生3D细胞培养环境，其主要由两种系统组成：一种为经马来酰亚酸功能化的聚合物（maleimide-functionalized polymer），另外一种为经巯基功能化（thiol-functionalized crosslinker）的交联剂。这两种成分在有细胞存在情况下混合后，巯基与maleimide基团形成巯醇键，从而将细胞包裹在形成的凝胶中，在交联反应之前，还可以选择肽物质（例如包括细胞粘附motifs），使其共价结合在maleimide集团上。水凝胶还可以用于在其表面上开展细胞培养。

Maleimide聚合物

有两种成分用作maleimide功能化多聚物：Mal-PVA和Mal-Dextran。PVA和dextran是骨架结构（backbone）经大量maleimide基团功能化的大分子多聚物，便于生物活性分子和交联剂的修饰反应。基于PVA多聚物生成的水凝胶性质稳定，不能被降解；而dextran水凝胶可通过添加dextranase酶降解，将细胞分离出来用于其它研究。

PEG-Link和CD-Link

交联剂也有两种：polyethylene glycol (PEG-Link)和polyethylene glycol peptide conjugate (CD-Link)。PEG-Link为末端含thiol基团的线性polyethylene glycol。CD-Link源于PEG-Link，其含有能被基质金属蛋白酶切割的肽。两种Maleimide聚合物都可以与PEG-Link或是CD-Link交联。PEG-Link稳定，不能降解，CD-Link则因含有可被基质金属蛋白酶切割的肽，细胞可以通过切割交联剂而在凝胶中扩散和迁徙。通过调整这些大分子聚合物和交联剂的混合方式和比例，生成不同特性的水凝胶，方法简便，无需其它附加装置。PVA, dextran and PEG等水凝胶成分皆为水溶性成分，它们不与细胞结合，不干扰细胞功能。而且通过添加粘附肽、细胞外基质蛋白或其它成分来研究三维环境下细胞表型提供了良好的环境。

细胞在水凝胶中培养

通常任何类型的细胞都适合在3D life水凝胶中培养，根据具体需要选择水凝胶类型。

细胞在PEG-Link交联形成的水凝胶中培养：

细胞可以通过单细胞或是细胞团的形式埋在PEG-Link为交联剂的水凝胶中，根据细胞类型不同，形成上皮样囊结构，微球体或是克隆。可以根据需要，为生成特定的表型而添加相应的细胞粘附因子。因这种水凝胶形成的孔径尺寸较小，约8 nm，细胞不能在这种水凝胶中迁移扩散。

细胞在CD-Link交联形成的水凝胶中培养：

细胞可以单细胞或是细胞团的形式埋在CD-Link为交联剂的水凝胶中，培养的细胞如产生相应的细胞外基质金属蛋白酶则能将临近的基质交联剂切割。在添加相应粘附因子基序下，诱导细胞扩散和迁移。

3D life水凝胶中细胞的固定与标记：

使用小分子物质，例如荧光标记phalloidin，核酸染料，活性和毒性检测试剂，增值检测试剂等小分子物质进行细胞标记方法，除了在孵育时间上适度延长以便能在水凝胶中充分扩散外，与传统的2D细胞培养方式相同。所培养的细胞如果经基因修饰含有荧光蛋白，则可直接用于观测，因凝胶完全透明不影响观测结果。如果使用抗体等大分子对细胞进行标记，因水凝胶的孔径原因，不能直接在水凝胶中开展，需要使用dextranase将细胞从水凝胶中释放出来，如果担心在操作过程中细胞有生理波动，则可经在凝胶中将细胞固定后再进行操作。

 关于Cellendes

Cellendes为德国Tübingen大学NMI自然科学和医学研究所(NMI Natural and Medical Sciences Institute)的衍生(spinoff)公司，由Brigitte Angres和Helmut Wurst博士与2009年筹建。Cellendes专门为3D细胞培养设计精巧、可操控的培养方案。Cellendes产品在药物研发和生物医药工程等领域被广泛选用。

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