题目一：（2009江苏高考题）下列有关实验及显色结果的叙述，错误的有（   ）
A．水浴加热条件下，蔗糖与斐林试剂发生作用生成砖红色沉淀
B．沸水浴条件下，脱氧核苷酸与二苯胺发生作用呈现蓝色
C．常温条件下，蛋白质与双缩脲试剂发生作用呈现紫色
D．常温条件下，核糖核酸与甲基绿作用呈现绿色
正确答案：ABD
    我的问题是，答案B错误在哪里？我的理解是，脱氧核苷酸含有脱氧核糖，可以和二苯胺发生反应生成蓝色。我查了下资料，《生物化学教程》（第二版，张洪渊主编，四川大学出版社，1994，成都。172页）也明确写到：“DNA或脱糖核苷酸与二苯胺发生反应生成蓝色物质”。

我继续查找资料得知：DNA与二苯胺发生反应必须在酸性条件下才能生成蓝色物质。DNA在酸性条件下加热，其嘌呤碱与脱氧核糖间的糖苷键断裂，生成嘌呤碱、脱氧核糖和脱氧嘧啶核苷酸，而2-脱氧核糖在酸性环境中加热脱水生成ω-羟基-γ-酮基戊糖，ω-羟基-γ-酮基戊糖再与二苯胺发生反应的。本题给的二苯胺不是二苯胺试剂，没有提供酸性环境，所以不能出现颜色变化。在有些题目里说DNA能与二苯胺试剂发生颜色变化，是因为二苯胺试剂配置过程中含有浓硫酸，从这里也可以看出，二苯胺和二苯胺试剂是有区别的。

除DNA外，脱氧木糖、阿拉伯糖也有同样的反应：

注：配制二苯胺试剂

取0.1毫升B液，滴入到10毫升A液中，混匀。⑦鉴定→取4毫升DNA提取液放入试管中，加入4毫升二苯胺试剂，混匀后观察溶液颜色(不变蓝)。用沸水浴(100°)加热10分钟。在加热过程中，随时注意试管中溶液颜色的变化(逐渐出现浅蓝色)。

题目二：（2012年江苏高考题第18题）下列关于“DNA粗提取与鉴定实验”的叙述，正确的是（   ）
A．洗涤剂能瓦解细胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度
B．将DNA丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝
C．常温下菜花匀浆中有些酶类会影响DNA的提取
D．用玻棒缓慢搅拌滤液会导致DNA获得量减少
正确答案：C
    我的问题在于B，答案B的说法应该也是正确的吧。针对二苯胺试剂鉴定DNA，在人教版选修一教材P56页中明确写道：混合均匀后，将试管置于沸水中加热5分钟。待试管冷却后，比较两支试管中溶液颜色的变化。
为什么“将DNA丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝”就是错误呢？

带着对本题的疑问，我在实验室自己做了这个实验，选择有氯化钠溶解的和没有氯化钠溶解作为对照组，结果发现：如果DNA没有用氯化钠溶解直接与二苯胺试剂加热，发现实验现象为先出现淡淡的粉色，接着变为紫色，随反应时间延长紫色越来越深；而用氯化钠溶解的DNA反应现象是出现蓝色，反应时间越长蓝色越深。说明DNA丝状物要在氯化钠溶液溶解后才能与二苯胺试剂发生颜色反应，这道高考题的答案是对的。

由此带来新的疑问：Nacl在DNA与二苯胺试剂的反应中起什么作用呢？它为什么会对其颜色反应有影响呢？我查到的资料：
  （1）DNA在酸性条件下加热，其嘌呤碱与脱氧核糖间的糖苷键断裂，生成嘌呤碱、脱氧核糖和脱氧嘧啶核苷酸，而2-脱氧核糖在酸性环境中加热脱水生成ω-羟基-γ-酮基戊糖，与二苯胺试剂反应生成蓝色物质。
  （2）DNA分子里面有各种基团，有正点的有负电的。氯化钠粒子可以在DNA分子外面形成一个“离子团”，包裹住DNA分子，减小DNA分子间的互相作用，增加DNA的溶解度。溶解就是非沉淀状态，是每个DNA分子以整个分子的形式均匀分布在溶液里。
  （3）盐溶：中性盐可以增加蛋白质溶解度,NaCl就是很典型的.原因简单说下-由于单分子吸附离子后,带电层使蛋白质分子彼此排斥,而蛋白质与水分子的相互作用增强,因此溶解度提高。

（4）取4毫升DNA提取液放入试管中，加入4毫升二苯胺试剂，混匀后观察溶液颜色(不变蓝)。用沸水浴(100°)加热10分钟，在加热过程中，随时注意试管中溶液颜色的变化(逐渐出现浅蓝色)。为什么会呈现蓝色，是因为发生了可逆反应的平衡移动，显示蓝色的离子数量明显多于其他时就会产生蓝色效应。
    (5)DNA的初步纯化：如果提取的DNA量不够多且其中含有较多杂质，或者加入溶液和搅拌等操作过程不规范，都会导致实验现象不明显，常常使制取的DNA粗制品不能显示出DNA的本色──白色。为了增进实验效果，需要对DNA粗制品进行简单的提纯，下面的方案可供参考。将DNA黏稠物再溶解，继续用2 mol/L的NaCl溶液20 mL溶解DNA黏稠物，仍旧沿一个方向不停搅拌3 min，使DNA充分溶解，以免损失。用3～4层纱布进行过滤（或离心），滤去杂质，收集含有DNA的滤液。向滤液中贴壁缓慢加入50 mL预冷的体积分数为95％的乙醇，并用玻璃棒朝一个方向缓慢、均匀地搅拌，溶液中会出现DNA丝状物。