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天文十七年(1548),道三决定退居第二线,打算由长子义龙为家督,但由于人心不稳,加上义龙及道三之间的关系渐恶,,当时民间有传之所以道三想让幼子做家督是因为长子是土岐一脉,究竟是不是恐怕也只有道三知道了。故道三打算废嫡,改立幼子孙四郎,但始终犹豫不决。
天文十八年(1549),道三对于信秀的敌对关系,希望得到缓和,加上得知其子为「尾张大傻瓜」的信长,暗自计划阴谋,与信秀以联姻而和解,以其女归蝶嫁与信长,并道「若信长果真如其名,汝可杀之」,但归蝶道「若夫君乃大才,归蝶或与夫君杀父!」最后归蝶终于嫁到织田家。
归蝶嫁入织田家后,道三过着半隐居的生活,天文二十二年(1553),道三突然决定与新为家督的信长于富田正德寺见面,计划如果信长真的是傻瓜,则就地格杀。道三故意早到,并走到附近民家等待信长的到来,不久信长带铁炮队及长枪队各五百人赴会,身穿一贯的奇装异服,道三见后大为开心,其家臣道「呜呼!此子真无用矣!」但道三看后大惊失色,原因在于队伍过于整齐,长枪队也并非用一般长枪,而是一种长2米,枪后有绑手带的特制枪,也是当时少见的能克制骑兵的长枪,更惊奇的是这种枪的研发人不是别人正是道三自己。到了正德寺之后,道三更震惊,信长以端庄礼服等待道三,令道三佩服不已,据说道三在是次会见中,常称信长为「贤婿」、「爱婿」,每每聊到日本未来的发展,与改革道三都打算倾其所能之力,从军事,政治上帮助贤婿要知道在那个无父无子的战国时代这是极为罕见的。更在会后与重臣说:「呜呼!我儿只配为上总介(信长)拉马为奴矣!」可见道三对信长评价之高。
回到美浓后,面对无能的长子,道三终于决定让幼子孙四郎为新家督,义龙得知后决定先下手为强,弘治元年(1555),义龙召孙四郎到稻叶山城,并借机把他杀死。当时正出外打猎的道三得知后,立即回鹫山集结三千人防守,但义龙纠结一万大军,以土岐正嫡的名义宣战,并与道三方对峙。
弘治二年(1556)四月十九,道三写下遗书:“旧之恶果今报矣,明日之战将五体不全,战死或非寡人之错,或有最终之去处,但在何方?”,同时写下让国状:“美浓一国现由织田上总介所有,得此让状,上总介必需遣兵渡此”,并将遗书与让国状一同送到尾张,把美浓送给了女婿信长。次日,道三率兵与义龙大战于长良川。信长得到遗书和让国状后,立即出兵营救,于途中得知由于兵力悬殊,道三军迅速溃败,道三本人也被敌方小牧道家讨杀。被称为日本三大枭雄之一的“美浓蝮蛇”在窃取主家的领地之后,也被自己的儿子讨取了命,享年六十三岁,葬于长良福光寺旁的首冢。由于道三经常在义龙面前夸奖信长之德才,训斥其之无能,义龙对信长早已是恨之入骨。义龙在掌握政权后,随即与织田氏断交,美浓从友国变为敌国。
在此期间信长得讯后立即出兵营救,但由于义龙也算是战争天才,还有道三生前对领地治理的太好,给领民们带来少有的幸福感所以领民们愿意拼死保护自己的家园,信长无奈撤回,不久之后,其子义龙死,由其孙龙兴为家督,但最终被道三的「贤婿」信长所打败,夺得美浓,为日后的天下布武成功踏出新一步,斋藤家就此灭亡,在此同时天下唯一认同信长才能的家族也灭亡了,其实义龙在与信长对抗中也是认同其才的,只是所追求的不一样所以只能为敌不能为朋友罢了。
美浓蝮蛇,信长之妻的下落:
小见方(明智光继之女),小见方在天文二(1533)年成为道三的正室,两年后天文四年时浓姬出生;天文十七(1548)年,嫁给信长,之后归蝶被称为浓姬,意义是美浓来的姬,信长与归蝶的婚姻是属于政略结婚,信长以道三为后盾
开始扩展势力,当道三死后归蝶的下场有四种说法,说法一:在本能寺被杀;说法二:道三死后因为归蝶已经没有利用价值,被送回美浓齐藤家(生父家);说法三:道三死后因为归蝶已经没有利用价值,被送回美浓明治家(生母家);说法四:一直保持住正室的地位,本能寺之变后仍活着,并成为安土殿,庆长十七年死亡,坟墓位在大德寺总见院,法名为养华院殿要津妙法大\\\"女市\\\"。