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色谱柱使用过程中柱压升高,如何解决?

(2010-07-01 16:29:35)
分类: 技术问答

关键词:柱压升高;解决方法

答:柱压与硅胶基质的形态(如无定形或球形硅胶)、颗粒大小、填料合成条件、装柱条件、所用流动相和分析时的温度有关。不同厂家的色谱柱柱压会有所差别,相同流动相和温度的条件下,不同厂家新色谱柱有的柱压可能相差4、5 个MPa,这是由厂家所选用的硅胶基质及其生产条件决定的,这种差异的存在是正常的。同时需要说明一点,柱压与柱效有一定的关系,通常柱效高的色谱柱柱压相对而言会高一点,但柱压高的色谱柱并不一定就具有高柱效。
      在色谱柱的使用过程中柱压通常会出现两种升高的形式:第一种是,随着使用时间的延长色谱柱柱压慢慢上升,这是正常的;第二种是,使用过程中(流动相和温度没有改变的条件下)色谱柱压力突然升高很多。这种压力突然升高的现象,通常由于使用不当引起的,原因:
      1)样品太脏,使用前没有过滤,导致柱筛板堵塞。
      2)样品含有的杂质在流动相中的溶解性不是很好,与流动相混合后析出,导致柱塞板堵塞。

 解决办法:将柱子反接,反冲柱子,如果压力有明显缓慢下降,则说明柱头阻塞,用pH=1稀磷酸及甲醇冲洗,有时能解决问题。 正接色谱柱后,压力还是缓慢上升,则拆开柱子,清洗柱子的过滤筛板,用25%HNO3超声清洗(或更换筛板)。如柱头很脏,刮去部分填料,用相同或相近的填料补上,很多情况下能解决问题。注意:压力升高有时是检测器阻塞造成的,拆下色谱柱,直接将进样阀与检测器相连,看看压力变化,同时检查连接管的通畅性。

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