PB和PBS

PB和PBS是免疫细胞化学实验中最为常用的缓冲液。PB是磷酸盐缓冲液，PBS是磷酸盐缓冲生理盐水。PB就是磷酸二氢钠和磷酸氢二钠按一定比例混合成的磷酸缓冲液，PBS在PB的基础上还加入NaCl

0.01mol/L的PBS主要用于漂洗组织标本、稀释血清等，其pH应在7.25～7.35之间，否则需要调整。

0.1mol/L的PB常用于配制固定液、蔗糖等。

一般情况下，0.2mol/l PB的pH值稍高些，稀释成0.01mol/L的PBS时，常可达到要求的pH值，若需调整pH，通常也是调PB的pH。
配制方法为：

1．0.2mol/L(pH7.4)磷酸盐缓冲液（Phosphate Buffer, PB）

试剂： NaH2PO4•2H2O

Na2HPO4•12H2O

配制方法：配制时，常先配制0.2mol/L的 NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4，两者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸盐缓冲液（PB），根据需要可配制不同浓度的PB和PBS。

（1）0.2mol/L的 Na2HPO4；称取Na2HPO4.12H2o 31.2g(或 NaH2PO4•H2O 27.6g)加重蒸水至1000ml溶解。

（2）0.2mol/L的 Na2HPO4：称取NaHPO4.•12H2o 71.632g（或 Na2HPO4•7H2O 53.6g或 Na2HPO4•2H2o 35.6g）加重蒸水至1000ml溶解。

（3）0.2mol/L pH7.4的PB的配制：取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的 Na2HPO4•12H2O,充分混合即为0.2mol/L的PB（pH约为7.4～7.5）。若pH偏高或偏低，可通过改变二者的比例来加以调整，室温保存即可。

2．0.01mol/L磷酸盐缓冲生理盐水（Phosphate Buffered Saline, PBS）

配制方法：称取NaCl 8.5～9g及0.2mol/L的PB 50ml，加入1000ml的容量瓶中，最后加重蒸水至1000ml，充分摇匀即可。若拟配制0.02mol/L的PBS，则PB量加倍即可，依此类推

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