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探究实验:酶催化作用专一性的证明:探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用

(2011-07-13 16:11:36)
标签:

宋体

淀粉酶

斐林试剂

麦芽糖

蔗糖

杂谈

分类: 2011远程研修

实验原理

淀粉(非还原性糖)麦芽糖

①                       还原性糖+斐林试剂砖红色Cu2O↓

蔗糖(非还原性糖) 葡萄糖+果糖

       用淀粉酶分别催化淀粉和蔗糖后,再用斐林试剂鉴定,根据是否有砖红色沉淀来判定淀粉酶是否对二者都有催化作用,从而探索酶的专一性。

    要点探讨:

    (1)保证蔗糖的纯度和新鲜程度是做好实验的关键。这是因为蔗糖是非还原性糖,如果其中混有少量的葡萄糖或果糖,或蔗糖放置久了受细菌作用部分分解成单糖,则与斐林试剂共热时能生成砖红色沉淀,使人产生错觉。为了确保实验的成功,实验之前应先检验一下蔗糖的纯度。可用市售大块冰糖,用水洗去其表面葡萄糖得到纯净的蔗糖。

    (2)实验中要将试管的下半部浸到37℃的温水中,因为淀粉酶在适宜的温度条件下催化能力最强。

    (3)在实验中,质量分数为3%的蔗糖溶液要现用现配(以免被细菌污染变质),取唾液时一定要用清水漱口,以免食物残渣进入唾液中。

    (4)制备的可溶性淀粉溶液,一定要完全冷却后才能使用,因为温度过高会使酶活性降低,甚至失去催化能力。

    (5)举一反三:证明酶的专一性实验中,既可以用不同的底物作自变量,也可以用不同的酶作自变量(底物相同)

    特别搜索:

    实验中所用酶的来源不同,则所需最适温度也不同。若淀粉酶为市售的α一淀粉酶,其最适温度为5075℃;若淀粉酶来自人体或生物组织,则最适温度为37℃左右。

(6)实验程序的自主设计与整合:

 

 

    试管

序号

    项目

    1

    2

  1

    注入可溶性淀粉溶液

    2 mL

    /

  2

  注入蔗糖溶液

    /

    2 mL

  3

  注入新鲜的淀粉酶溶液

  2 mL振荡

  2 mL振荡

  4

  60热水保温

    5 min

    5 min

  5

    加斐林试剂

    2 mL振荡

    2 mL振荡

  6

    将试管下半部放热水中加热煮沸

    1 min

    l min

  7

  观察实验结果

有砖红色沉淀

无砖红色沉淀

结论

淀粉酶只能催化淀粉的水解,不能催化蔗糖的水解

典例分析某学生完成了下面的实验:他用碘液检验一块干面包,面包变成了深蓝色。然后他嚼碎了另一块干面包,并用本尼地溶液(一种用来检验麦芽糖的试剂)检验之,嚼碎的面包变成了红色(麦芽糖与试剂反应的颜色),因此,他作出结论,认为当面包被嚼碎时淀粉变成了麦芽糖。这位学生的实验设计的错误在于:

A.未对嚼碎的面包做淀粉检验    B.未对唾液做淀粉检验

C.未对干面包做麦芽糖的检验    D.未考虑面包的制作时间

评析:该同学忽视了实验设计的对照性原则,他的实验注意了实验前淀粉的检测,和实验后麦芽糖的检测,这两者可比性不强,结果没有说服力,所以应该在实验前检测一下,干面包中有没有麦芽糖,再通过结果对比来做出结论。

答案:C

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