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创伤性脑损伤(traumatic brain
injury,TBI)严重危害人类健康在神经外科中占重要位置,其发病率高、病情变化快、致残率和死亡率高。分类有如下几种颅脑损伤类型,如脑组织暴露在空气中为开放伤,与外界不沟通的脑损伤为闭合伤,由火器
造成的损伤为火器伤,常在颅内残留弹片等异物;伤及头皮和颅骨为颅损伤;伤及脑组织、脑血管和颅神经为脑损伤,外物直接打击头部,产生原发性脑损伤。由低血压、低氧或高碳酸血症等造成脑缺氧、脑水肿或脑温升高,产生继发性脑损伤,根据gcs评分法,14-15分为轻度伤,9-13为中度伤,3-8为重度伤等。研究其生物力学致伤机制制备相应的脑损伤模型并进行行为评价,有利于提高对创伤性脑损伤的认识和防治水平,脑损伤模型现对应不用致病机理已有:自由落体模型、冷冻性脑损伤模型、液压性脑损伤模型以及缺血缺氧脑损伤等模型.
由于实验条件及技术有限,我们课题小组采用的是实在采用改良的Feeney氏法自由落体撞击来创伤性脑外伤模型(手机拍的相素太低,这是由我们实验楼的一个厕所同学们自己改建的,虽不大,但是我们锻炼动手能力的乐园)
药品:1~1.5%戊巴比妥钠,生理盐水,75%乙醇
仪器设备:常规手术器械、BA-200小鼠避暗仪、DT-200跳台自动测试仪、ZZ-6小鼠自主活动测试仪(学习仪器设备的操作使用)
(2)实验步骤:
① 小鼠脑损伤模型的制作:
实验采用改良的Feeney氏法自由落体撞击来制作创伤性脑外伤模型。用1~1.5%戊巴比妥钠(50mg/kg)行小鼠腹腔注射麻醉。麻醉完全后,将大鼠俯卧位固定于动物实验台,常规消毒铺巾,头正中切开皮肤,分离骨膜,暴露左侧顶骨,于矢状缝旁2.5 mm,冠状缝后1.5 mm钻一骨孔,咬除颅骨直至骨窗扩大为5.0 mm×5.0 mm,显露硬脑膜,在硬脑膜上放置一与骨孔大小吻合的垫片,以40g重的铁质圆柱体自25 cm高自由落体撞击垫片,造成左侧大脑半球脑挫裂伤。
② 行为学检查:
A.使用Longa等的5级评分标准
0级:无体征
1级:动物不能完全伸直其右前肢
2级:动物右侧肢体瘫痪,出现追尾现象
3级:动物不能站立/打滚
4级:无自发性活动,有意识障碍
(参考文献:Longa EZ.Weinstein PR,Carlson S.et a1.Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats.Stroke,1989,20:84~91.)
B.自主活动测试
C.学习与记忆能力测定。
避暗、跳台测试
通过整个实验,知道了简单的手术操作方法,但在实验过程中,也发现了不少问题,主要是集中在手术阶段和行为评价阶段,手术阶段是实验仪器在操作过程中发现,首先是在进行钻骨孔的过程中,无专业钻孔器械,采用的是单纯的解剖刀钻孔,容易事先就已经对小鼠的硬脑膜造成损伤;其次是重锤实施打击时,容易出现反弹,造成二次损伤,影响结果的准确性;再次是由于实验采取的动物模型是小鼠,小鼠头部较小,不利于打击定位;最后是在行为评价时,进行小鼠跳台实验时,事先放入的小鼠容易从跳台上跑下来,又需要实验者重新抓取,费时,现在我已经想出了一个解决办法,但尚在改进之中.......