验证DNA是遗传物质的实验——噬菌体侵染大肠杆菌实验分析

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验证DNA是遗传物质的实验——噬菌体侵染大肠杆菌实验分析
江苏省沭阳高级中学
一、噬菌体侵染大肠杆菌的基本步骤:
1.吸附;2.注入;3.复制和合成;4.组装;5.释放
二、赫尔希与蔡斯实验:
1.基本步骤:
(1)原理:用35S标记蛋白质,用32P标记DNA,标记时不能同时进行,要分别标记,分开考查;由于噬菌体无法在培养基中培养,因此先标记大肠杆菌。
(2)用分别含有35S、32P原料的培养基培养大肠杆菌,一段时间后,大肠杆菌就会被标记上放射性同位素;
(3)用噬菌体侵染被标记的大肠杆菌,让子代噬菌体被标记上放射性同位素;
(4)用标记后的噬菌体侵染未被标记的大肠杆菌。
(5)搅拌(目的是让噬菌体外壳与大肠杆菌分离,因此搅拌要充分);
(6)离心。(上清液中含有噬菌体外壳,沉淀物中含有大肠杆菌)
2.目的是验证究竟是噬菌体的DNA还是蛋白质外壳进入了大肠杆菌。
3.时间控制:搅拌和离心要控制在注入之后,释放之前。
4.实验分析:
http://s1/bmiddle/001PULUAgy6Ft9Zen4c60&690
从结果来看,应该是噬菌体的DNA进入了大肠杆菌,而不是蛋白质外壳。
5.实验误差分析:
(1)用35S标记后,沉淀物中之所以出现放射性是因为搅拌不充分;
(2)用32P标记后,上清液之所以出现放射性原因有两个:一是有部分噬菌体未能够侵染大肠杆菌(DNA未注入);二是有部分子代噬菌体提前释放。