减少家蚕疾病的发生是确保蚕桑生产安全高产的重要条件之一，目前主要依靠消毒的方法来实现这一目的。在我国的蚕桑生产中，常用的消毒剂为四类：一是以漂白芬为代表的氯制剂类，二是以福尔马林为代表的甲醛制剂类，三是表面活性剂类，四是以盐酸、石灰为代表的酸碱类。国内在蚕药研制方面，相继研制出用于蚕体、蚕座消毒的聚甲醛散、防病1号、防病2号、蚕座净等；用于蚕室蚕具消毒的漂白芬、甲醛溶液、各种氯、醛制剂等。其特点为：以化学药剂为主，不注重生态环保型，对环境污染严重，使用不便。未来蚕用消毒剂的发展趋势是必须具备使用简易安全、杀菌广谱、无腐蚀性、高效低毒、生态环保型等优点。因此，开展新的蚕用消毒剂的开发对我国蚕业的可持续发展具有相当的创新价值。

稳定二氧化氯是一种多功能工业与民用化工产品，1985年由美国百合兴公司首先研制成功，经美国农业部（EPU）和美国环保局（EPA）确认为食品消毒剂，美国食品与药物管理局（FDA）批准为食品添加剂。日本、澳大利亚及西欧各国相继立法，将其确定为替代氯系消毒剂的第四代安全消毒剂和食品添加剂。它不仅是一种广谱、高效、无毒的消毒剂。而且还是优良的水处理剂、食品保鲜、漂白剂、防腐剂和除臭剂。于是迅速在水处理行业、食品行业、医疗保健行业、造纸行业、畜牧养殖行业、日化行业得到广泛的应用，但是在蚕桑生产上的应用还不多见。

二、 试验报告

（一） 试验目的

       研究“双剑牌”二氧化氯消毒剂在蚕桑业上的应用，包括该药剂对家蚕病原微生物的消毒效果、对家蚕的生理影响以及对桑叶的影响等。

（二） 试验药剂

       “双剑牌”二氧化氯消毒剂，由广州市九九消毒剂有限公司提供。

（三） 试验内容

       本试验共分四部分的内容，分别为: “双剑牌”二氧化氯消毒剂对家蚕病原微生物消毒作用试验；“双剑牌”二氧化氯对家蚕饲养的影响试验；“双剑牌”二氧化氯叶面消毒对桑叶的药害试验；“双剑牌”二氧化氯添食对预防家蚕病毒病的试验。

 

1.“双剑牌”二氧化氯消毒剂对家蚕病原微生物消毒作用

1.1 供试病原菌

       真菌和细菌：白僵菌、绿僵菌、曲霉菌、黑胸败血菌、Bt 取新鲜菌用无菌水加少量吐温－80分别配成浓度为2×10⁷、2×10⁷、1×10⁷、4×10⁸、5×10⁸个分生孢子或菌/mL的菌悬液。

       病毒：核型多角体（NPV）和质型多角体（CPV）稀释成2.5×10⁷、2×10⁷个多角体/ml的悬液。

       家蚕微粒子（N.b）：将新继代的N.b配成1.5×10⁸个/mL的悬液。

1.2 试验方法

1.2.1 对病原真菌、细菌的杀灭效果

       将二氧化氯液作用于白僵菌、绿僵菌、曲霉菌、黑胸败血菌及Bt的菌悬液30min后，取0.1mL均匀涂抹于培养基上，每个处理重复3次，26℃条件下培养24d，观察菌落生长情况。每处理设3个重复。

1.2.2 对病毒的杀灭效果

       将配好浓度的NPV和CPV均匀涂于2cm×4cm载玻片上，每片0.1mL，阴干后用不同浓度的消毒剂浸渍消毒30min，消毒结束后，将玻片用清水轻轻漂洗2次，除去药液，然后每玻片加0.1mL无菌水，用玻棒刮下载玻片上的病毒给蚕添食。设毒对照和空白对照，空白对照区用无菌水代替消毒剂同等处理。每处理设3个重复，每个重复20头蚕。

1.2.3 对微粒子的杀灭效果

       取0.1mLN.b加不同浓度的消毒剂0.9ml处理10min后，3000r/min离心，弃清液，加蒸馏水再离心一次，最终取N.b沉淀加蒸馏水0.1mL，摇匀后涂抹再一定面积的桑叶上，让二龄蚕全部食下，设毒对照和空白对照，空白对照区以无菌水代替消毒剂进行同样处理。每处理设3个重复，每个重复20头蚕。

1.3 灭菌效果的判断

       真菌和细菌经消毒处理后，接种培养基，以菌落生长情况作为判断标准。微粒子和多角体病毒经过消毒处理后，均匀涂抹在桑叶上，供一定数量的蚕食下，饲养一段时间后，调查发病率，并以发病率计算消毒效果，以消毒效果作为判断依据。

1.3 结果与分析

1.3.1 对真菌、细菌的杀灭效果

       从表1可以看出，二氧化氯对白僵、绿僵、曲霉、黑胸败血菌以及Bt作用30min后，随着二氧化氯含量的升高灭菌效果在提高，在二氧化氯含量为100mg/L时，除曲霉菌外，几种病原菌均没有生长。由此实验结果可知，“双剑牌”二氧化氯对家蚕病原真菌和细菌有很好的杀灭效果。

    表1 对病原真菌、细菌的杀灭效果

注：“-”表示无菌生长；“+”表示菌极少量生长；“++”表示菌少量生长；“+++”表示菌大量生长。

1.3.2 对多角体病毒及微粒子的杀灭效果

表2 对多角体病毒及微粒子的杀灭效果

       从表2可以看出，二氧化氯对家蚕多角体病毒和微粒子作用30min后，消毒效果随二氧化氯含量的升高而提高，对微粒子的杀灭作用最强，在50mg/L时，消毒效果就达到100％，在二氧化氯含量为75mg/L时，对家蚕核型多角体病毒的杀灭效果达到100％。对家蚕质型多角体病毒要达到100％杀灭效果，需二氧化氯含量100mg/L。

2 “双剑牌”二氧化氯对家蚕饲养的影响

2.1 供试蚕品种

菁松、皓月

2.2 试验方法

       取1龄起蚕，按含二氧化氯有效含量为25mg/L，50 mg/L，75 mg/L，100 mg/L，125 mg/L5个梯度分别对桑叶喷洒喂食处理，共5个处理，每处理3组重复，每组100头蚕。饲育至上簇采茧。以喷清水饲养家蚕为对照。处理技术标准一致。调查眠蚕体重、龄期经过、熟蚕体重及茧质。对75mg/L的浓度处理区制种，制种时分别以菁松和皓月对交制普通杂交种。制种结束后，每区随机抽取200粒茧进行单蛾制种，调查制种成绩。蚕种经浸酸处理打破滞育后，调查孵化率。

2.3 结果与分析

2.3.1 蚕期结果

表1  二氧化氯喷洒桑叶添食对菁松的生长发育、茧质的影响（2007.10 合肥）

       从表1数据可以看出，二氧化氯喷洒桑叶添食对家蚕的生长发育及茧质均无不良影响。说明“双剑牌”二氧化氯消毒剂是一种对家蚕安全的药剂。

2.3.2 制种结果

       由表3可知，2个原种正反交的杂种1代，其各项指标均为试验区的略优于对照区。平均化蛾率、产卵数、良卵率和实用孵化率等试验区的与对照区均无显著差异。试验结果表明使用二氧化氯消毒对蚕种种质无不良的影响。

表3 对蚕种种质的影响