花药和花粉培养

 花药培养：把发育到一定阶段的花药接种到人工培养基上，使其发育和分化成植株的过程。

花粉培养：从花药中分离出花粉粒，使之成为分散或游离的状态。通过培养使花粉粒脱分化，发育成完整器官。（小孢子培养）

目的：发育成单倍体

花粉母细胞 减速分裂 四个小孢子 单核花粉 二核花粉

2n                    1n         

作物育种：利用代杂交花药或花粉培养

突变体选育

应用：遗传研究

    分子生物学

                                        花药培养

1外植体选择：适宜的时期：单核的中，晚期--靠边期。

发育鉴定法：1》压片法：将花蕾置于无菌条件下进行表面消毒，取此花药，在酒精中快速浸一下，用1%醋酸洋红压片进行镜检，即可确定花粉的发育阶段。

2》外部形态观察法：通够对植株的观察

2预处理：提高花粉胚和花粉 愈伤组织诱导率。

       方法：高，低温预处理，离心处理，化学试剂（乙烯利等）预处理等，低温冷藏是最常用的方法。

3材料的消毒和接种

      将花蕾或幼穗的表面用75%酒精，0.1%升汞

4培养基和培养条件

  MS：双子叶植物花药培养

  B5：豆科和十字花科

  N6：禾谷科                 

培养基渗透压:可通过蔗糖浓度调节来满足不同植物对渗透压不同要求，一般认为单子叶植物比双子叶植物需糖浓度高

较高 愈伤

低  愈伤  苗

2,4-D对于愈伤和胚珠诱导均有促进作用

细胞分裂素（KT,BA）可促进茄科植物花药的分化

培养方法：

固体培养：

液体漂浮培养：可提高花粉胚和愈伤组织的形成比例

培养条件：

温度4—28 培养初期，较高温度有利于愈伤组织形成

光照：一般暗培养，待愈伤组织形成后转移到光下促进分化。

光照1000-2000lx,光周期14小时，不同植物最适条件不同。

5植株再生

花粉植株可通过两种途径再生

：1由花粉诱导形成胚状途径

  2由花粉诱导形成愈伤组织，诱导不定芽。