常用缓冲溶液的配制方法_我们都爱微生物

http://blog.sina.com.cn/u/1648720217

首页博文目录关于我

个人资料

微博

加好友发纸条

写留言加关注

博客等级：
博客积分：

博客访问：
关注人气：
获赠金笔：0支
赠出金笔：0支
荣誉徽章：

正文字体大小：大中小

常用缓冲溶液的配制方法

(2014-10-17 16:02:14)

标签：

微生物学

实验

缓冲液

试剂

分类：微生物学实验技术

常用缓冲溶液的配制方法

1． 甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L）

X毫升0.2 mol/L甘氨酸+Y毫升0.2 mol/L HCI，再加水稀释至200毫升

2.0

2.4

2.6

2.8

44.0

32.4

24.2

16.8

3.0

3.2

3.4

3.6

11.4

8.2

6.4

5.0

甘氨酸分子量 = 75.07，0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。

2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L）

X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾 + 0.2 mol/L HCl，再加水稀释到20毫升

pH(20℃)

2.2

2.4

2.6

2.8

3.0

4.070

3.960

3.295

2.642

2.022

3.2

3.4

3.6

3.8

1.470

0.990

0.597

0.263

邻苯二甲酸氢钾分子量 = 204.23，0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升

3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液

0.2mol/L Na₂HPO₄

（毫升）

0.1mol/L

柠檬酸

（毫升）

0.2mol/L Na₂HPO₄

（毫升）

0.1mol/L

柠檬酸

（毫升）

2.2

2.4

2.6

2.8

3.0

3.2

3.4

3.6

3.8

4.0

4.2

4.4

4.6

4.8

5.0

0.40

1.24

2.18

3.17

4.11

4.94

5.70

6.44

7.10

7.71

8.28

8.82

9.35

9.86

10.30

10.60

18.76

17.82

16.83

15.89

15.06

14.30

13.56

12.90

12.29

11.72

11.18

10.65

10.14

9.70

5.2

5.4

5.6

5.8

6.0

6.2

6.4

6.6

6.8

7.0

7.2

7.4

7.6

7.8

8.0

10.72

11.15

11.60

12.09

12.63

13.22

13.85

14.55

15.45

16.47

17.39

18.17

18.73

19.15

19.45

9.28

8.85

8.40

7.91

7.37

6.78

6.15

5.45

4.55

3.53

2.61

1.83

1.27

0.85

0.55

Na₂HPO₄分子量 = 14.98，0.2 mol/L溶液为28.40克/升。

Na₂HPO₄·2H₂O分子量 = 178.05，0.2 mol/L溶液含35.01克/升。

C₄H₂O₇·H₂O分子量 = 210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。

4．柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液

钠离子浓度

（mol/L）

柠檬酸（克）

C₆H₈O₇·H₂O

氢氧化钠(克)

NaOH 97%

盐酸（毫升）

HCl（浓）

最终体积（升）^①

2.2

3.1

3.3

4.3

5.3

5.8

6.5

0.20

0.35

0.45

0.38

210

245

285

266

144

186

156

160

116

106

105

126

① 使用时可以每升中加入1克克酚，若最后pH值有变化，再用少量50% 氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。

5．柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液（0.1 mol/L）

0.1 mol/L

柠檬酸

（毫升）

0.1 mol/L

柠檬酸钠

（毫升）

0.1 mol/L

柠檬酸

（毫升）

0.1 mol/L

柠檬酸钠

（毫升）

3.0

3.2

3.4

3.6

3.8

4.0

4.2

4.4

4.6

4.8

18.6

17.2

16.0

14.9

14.0

13.1

12.3

11.4

10.3

9.2

1.4

2.8

4.0

5.1

6.0

6.9

7.7

8.6

9.7

10.8

5.0

5.2

5.4

5.6

5.8

6.0

6.2

6.4

6.6

8.2

7.3

6.4

5.5

4.7

3.8

2.8

2.0

1.4

11.8

12.7

13.6

14.5

15.3

16.2

17.2

18.0

18.6

柠檬酸C₆H₈O₇·H₂O：分子量210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。

柠檬酸钠Na₃ C₆H₅O₇·2H₂O：分子量294.12，0.1 mol/L溶液为29.41克/毫升。

6．乙酸–乙酸钠缓冲液（0.2 mol/L）

pH(18℃)

0.2 mol/L

NaAc

(毫升)

0.3 mol/L

HAc

(毫升)

pH(18℃)

0.2 mol/L

NaAc

(毫升)

0.3 mol/L

HAc

(毫升)

2.6

3.8

4.0

4.2

4.4

4.6

0.75

1.20

1.80

2.65

3.70

4.90

9.25

8.80

8.20

7.35

6.30

5.10

4.8

5.0

5.2

5.4

5.6

5.8

5.90

7.00

7.90

8.60

9.10

9.40

4.10

3.00

2.10

1.40

0.90

0.60

Na₂Ac·3H₂O分子量 = 136.09，0.2 mol/L溶液为27.22克/升。

7．磷酸盐缓冲液

（1）磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液（0.2）

0.2 mol/L

Na₂HPO₄

(毫升)

0.3 mol/L

NaH₂PO₄

(毫升)

0.2 mol/L

Na₂HPO₄

(毫升)

0.3 mol/L

NaH₂PO₄

(毫升)

5.8

5.9

6.0

6.1

6.2

6.3

6.4

6.5

6.6

6.7

6.8

6.9

8.0

10.0

12.3

15.0

18.5

22.5

26.5

31.5

37.5

43.5

49.5

55.0

92.0

90.0

87.7

85.0

81.5

77.5

73.5

68.5

62.5

56.5

51.0

45.0

7.0

7.1

7.2

7.3

7.4

7.5

7.6

7.7

7.8

7.9

8.0

61.0

67.0

72.0

77.0

81.0

84.0

87.0

89.5

91.5

93.0
94.7

39.0

33.0

28.0

23.0

19.0

16.0

13.0

10.5

8.5

7.0

5.3

Na₂HPO₄·2H₂O分子量 = 178.05，0.2 mol/L溶液为85.61克/升。

Na₂HPO₄·12H₂O分子量 = 358.22，0.2 mol/L溶液为71.64克/升。

NaH₂PO₄·2H₂O分子量 = 156.03，0.2 mol/L溶液为31.21克/升。

（2）磷酸氢二钠–磷酸二氢钾缓冲液（1/15 mol/L）

mol/L/15Na₂HPO₄

(毫升)

mol/L//15KH₂PO₄

(毫升)

mol/L//15Na₂HPO₄

(毫升)

mol/L//15KH₂PO₄

(毫升)

4.92

5.29

5.91

6.24

6.47

6.64

6.81

6.98

0.10

0.50

1.00

2.00

3.00

4.00

5.00

6.00

9.90

9.50

9.00

8.00

7.00

6.00

5.00

4.00

7.17

7.38

7.73

8.04

8.34

8.67

8.18

7.00

8.00

9.00

9.50

9.75

9.90

10.00

3.00

2.00

1.00

0.50

0.25

0.10

Na₂HPO₄·2H₂O分子量 = 178.05，1/15M溶液为11.876克/升。

KH₂PO₄分子量 = 136.09，1/15M溶液为9.078克/升。

8．磷酸二氢钾–氢氧化钠缓冲液（0.05M）

X毫升0.2M K₂PO₄ + Y毫升0.2N NaOH加水稀释至29毫升

pH(20℃)

X (毫升)

Y（毫升）

pH(20℃)

X (毫升)

Y（毫升）

5.8

6.0

6.2

6.4

6.6

6.8

0.372

0.570

0.860

1.260

1.780

2.365

7.0

7.2

7.4

7.6

7.8

8.0

2.963

3.500

3.950

4.280

4.520

4.680

9．巴比妥钠-盐酸缓冲液（18℃）

0.04M巴比妥钠溶液

0.2V盐酸

0.04M巴比妥钠溶液(毫升)

0.2N盐酸(毫升)

6.8

7.0

7.2

7.4

7.6

7.8

8.0

8.2

100
100

100

18.4

17.8

16.7
15.3

13.4

11.47

9.39

7.21

8.4

8.6

8.8

9.0

9.2

9.4

9.6

100

5.21

3.82

2.52

1.65

1.13

0.70

0.35

巴比妥钠盐分子量=206.18;0.04M溶液为8.25克/升

10．Tris–盐酸缓冲液（0.05M，25℃）

50毫升0.1M三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液与X毫升0.1N盐酸混匀后，加水稀释至100毫升。

X(毫升)

7.10

7.20

7.30

7.40

7.50

7.60

7.70

7.80

7.90

8.00

45.7

44.7

43.4

42.0

40.3

38.5

36.6

34.5

32.0
29.2

8.10

8.20

8.30

8.40

8.50

8.60

8.70

8.80

8.90

26.2

22.9
19.9

17.2

14.7

12.4

10.3

8.5

7.0

三羟甲基氨基甲烷（Tris）HOCH2 CH2OH CHOCH2 NH2

分子量=121.14;

0. 1M溶液为12.114克/升。Tris溶液可从空气中吸收二氧化碳，使用时注意将瓶盖严。

11．硼酸–硼砂缓冲液（0.2M硼酸根）

0.05M硼砂（毫升）

0.2M硼酸（毫升）

0.05M硼砂（毫升）

0.2M硼酸（毫升）

7.4

7.6

7.8

8.0

1.0
1.5

2.0

3.0

9.0

8.5

8.0

7.0

8.2

8.4

8.7

9.0

3.5

4.5

6.0

8.0

6.5

5.5

4.0

2.0

硼砂Na₂B₄O₇·H₂O,分子量=381.43; 0.05M溶液（=0.2M硼酸根）含19.07克/升。

硼酸H₂BO₃,分子量=61.84, 0.2M溶液为12.37克/升。

硼砂易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。

12．甘氨酸–氢氧化钠缓冲液（0.05M）

X毫升0.2M甘氨酸+Y毫升0.2NnaOH加水稀释至200毫升

8.6

8.8

9.0

9.2

9.4

4.0

6.0

8.8

12.0

16.8

9.6

9.8

10.0

10.4

10.6

22.4

27.2

32.0

38.6

45.5

甘氨酸分子量=75.07;0.2M溶液含15.01克/升。

13．硼砂-氢氧化钠缓冲液（0.05M硼酸根）

X毫升0.05M硼砂+Y毫升0.2NNaOH加水稀释至200毫升

9.3

9.4

9.6

6.0
11.0

23.0

9.8

10.0

10.1

34.0

43.0

46.0

硼砂Na₂B₄O₇·10H₂O,分子量=381.43;0.05M溶液为19.07克/升。

14．碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液（0.1M）

Ca²⁺、Mg²⁺存在时不得使用

0.1MNa₂CO₃(毫升)

0.1MN₂HCO₃(毫升)

20℃

37℃

9.16

9.40

9.51

9.78

9.90

10.14

10.28

10.53

10.83

8.77

9.12

9.40

9.50

9.72

9.90

10.08

10.28

10.57

Na₂CO₂·10H₂O分子量=286.2;0.1M溶液为28.62克/升。

N₂HCO₃分子量=84.0;0.1M溶液为8.40克/升。

15．“PBS”缓冲液

7.6

7.4

7.2

7.0

H₂O

NaCl

Na₂HPO₄

NaH₂PO₄

1000

8.5

2.2

0.1

1000

8.5

2.2

0.2

1000

8.5

2.2

0.3

1000ml

8.5g

2.2g

0.4g

阅读┊ 收藏 ┊ 喜欢 ▼ ┊打印┊举报/Report

前一篇：微生物菌种保藏

后一篇：微生物培养基

新浪BLOG意见反馈留言板　欢迎批评指正