重组人生长激素体外干预人胃癌细胞生长及受体表达

蒋苏豫  李苏宜*

（东南大学医学院 南京210009 *通讯作者：njlisuyi@sina.com）

目的  研究体外环境下重组人生长激素（rhGH）对生长激素受体（GHR）不同表达状态的人胃癌细胞株增殖、分裂及其细胞膜表面GHR密度的影响。

方法  采用免疫细胞化学方法检测人胃癌细胞株SGC-7901、MKN-45、BGC-823、HGC-27、AGS、MGC-803共六种细胞膜表面GHR表达情况，筛选出强阳性表达SGC-7901、阴性表达 BGC-823 细胞株，采取25 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml rhGH干预和未处理4种干预方式体外培养上述2株细胞，采用四甲基偶氮咗蓝比色法、羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂（CFSE）荧光染色法分析不同浓度rhGH对人胃癌细胞系的细胞生长增殖、细胞分裂等的影响。ELISA法分析不同浓度rhGH对人胃癌细胞系的细胞IGF-Ⅰ分泌的影响。利用流式、放射性受体分析方法定量检测rhGH处理后细胞膜表面GHR表达情况。

结果  细胞株SGC-7901高表达GHR，与未处理组比较，25、50、100ng/ml rhGH干预24h后生长率明显增高为：106.527%、114.594%、105.824%（P <0.05）,48 h 后生长率明显增高为：107.113%、114.208%、105.428%（P <0.05）；CFSE荧光强度明显减弱（P <0.05）；未处理组、25ng/ml rhGH、50ng/ml rhGH、100ng/ml rhGH干预24小时后下游蛋白IGF-1分别为153.47±24.46、203.58±18.27、219.63±14.06、217.94±33.61pg/ml，rhGH干预组明显增高（P<0.05）；25ng/ml rhGH、50ng/mlrhGH、100ng/mlrhGH干预后，流式细胞术检测胞膜表面GHR表达情况，荧光强度较未处理组明显增加（P<0.05）。放射性受体分析法检测干预后胞膜表面GHR位点数（10⁴/细胞）分别为：3.73±0.10、4.04±0.42、3.87±0.27，明显多于空白对照组2.97±0.42（P <0.05）。细胞株BGC-823未表达GHR，与未处理组比，rhGH干预组生长率、CFSE荧光强度、下游蛋白IGF-Ⅰ、GHR表达差异均无统计学意义（P >0.05）。

结论  体外环境下，rhGH可以促进GHR高表达人胃癌细胞株SGC-7901增殖及分裂、提高其IGF-Ⅰ的表达量、增加其胞膜GHR密度，但不促进BGC-823增殖，也不会改变其GHR阴性表达状态。

关键词：重组人生长激素 生长激素受体 胰岛素样生长因子-Ⅰ 胃癌