撰文：詹尼佛.齐巴                   2023年12月10日

自从基因编辑工具被开发出来以来，科学家们一直在试验如何使用CRISPR，来治疗和潜在地治愈艾滋病毒。（图片：vchal via Getty Images）

在一项正在进行的临床试验中，研究人员正在测试一剂，可能有效治愈人类免疫缺陷病毒（HIV）感染的新基因疗法，对人类是否安全。

该疗法名为EBT-101，涉及使用CRISPR-Cas9基因编辑来治疗艾滋病毒。自2012年CRISPR-Cas9开发以来，已经在动物模型中研究了这种潜在的治疗策略。然而，这是第一次在人类身上尝试这种基因编辑治疗艾滋病毒。试验的最新数据表明，EBT-101在测试的剂量下是安全的，但我们还不知道它是否能治愈艾滋病毒。

根据联合国艾滋病毒/艾滋病规划署（UNAIDS）的数据，2022年全球约有3900万人感染艾滋病毒，当年约有63万人因与艾滋病相关死亡，使艾滋病毒成为持续的公共卫生负担。尽管少数人通过强化干细胞移植有效治愈了艾滋病毒，但目前还没有疫苗或容易获得的治疗方法。

西北大学细胞与发育生物学教授托马斯·霍普没有参与这项工作，他在一封电子邮件中告诉《生活科学》，EBT-101试验“是开发这项技术治疗包括艾滋病毒在内的人类疾病和感染的重要一步”。

但是，有一天我们真的有多大可能使用CRISPR来治愈艾滋病毒？

CRISPR如何（理论上）治愈艾滋病毒?

HIV感染，通常用于对抗病毒宿主感染的免疫细胞。病毒利用免疫细胞的机制，将自己的DNA插入宿主的基因组，使病毒得以复制。如果艾滋病毒感染得不到治疗，可能会导致获得性免疫缺陷综合征，导致免疫系统严重削弱，使感染者极易受到其他感染、癌症和早逝的影响。

联合抗逆转录病毒疗法（cART）是艾滋病毒治疗的支柱，它限制了病毒的复制，从而将人们的寿命延长到接近正常的长度，并减少了传播艾滋病毒的机会。然而，这些疗法必须终生服用，不能治愈。

阿姆斯特丹大学医学中心传染病副教授艾琳娜.郝雷拉.卡里略告诉《生活科学》：“艾滋病毒治疗的现有挑战，在于病毒在人体细胞内创造有复原力的基因库。”郝雷拉.卡里略的实验室专注于使用CRISPR，编辑携带HIV宿主的细胞，尽管正在进行cART治疗。这种现象被称为“潜伏性HIV”，当病毒感染一种称为CD4+记忆T细胞的免疫细胞时就会发生，这种免疫细胞可以持续几十年。

郝雷拉·卡里略告诉《生活科学》，cART疗法可以抑制病毒复制，但如果治疗中断，“休眠的前病毒可以重新激活，使治愈变得难以捉摸”。

CRISPR通过靶向和切除基因组中的特定DNA序列来发挥作用；一个“指南”引导CRISPR著名的“分子剪刀”找到靶基因。这要么使基因失活，要么使其被移除并交换成不同的DNA。研究小组认为，这种策略可以有效地消除潜在的艾滋病毒感染，因为它可以将病毒DNA，靶向嵌入基因组中，而不仅仅是阻止复制。

《临床研究杂志》2020年的一篇综述指出，将CRISPR用于HIV基因治疗，在几项试管研究中显示出了前景。各个小组一直在努力将试管中的疗法带给人类患者——这就引出了EBT-101。

关于EBT-101

根据最近在布鲁塞尔举行的欧洲基因和细胞治疗学会年会上的一份报告，EBT-101使用多种指南靶向基因组中的多个位点，并剪切出大部分潜在整合的HIV DNA。这阻止了艾滋病病毒的复制。

坦普尔大学神经病毒学和基因编辑教授、Excision 生物治疗联合创始人凯米尔.卡里里，十年来一直与该公司合作开发EBT-101。2020年和2023年，卡里里和他的团队发表的报告显示，EBT-100，EBT-101的前体，安全地靶向并去除了受感染灵长类动物的HIV DNA。

现在，他们正在一项早期临床试验中，测试他们的EBT-101靶向策略，该试验主要关注治疗的安全性。三名接受治疗的患者的初步结果显示，没有毒性作用或严重不良事件。目前，所有患者的HIV都被cART抑制。

霍普说：“最初的安全性结果很有希望，因为到目前为止还没有观察到不良结果。”霍普的实验室研究艾滋病毒感染背后的机制。他补充道：“但还需要更多的时间来确定，因为基因脱靶突变可能需要数年时间才能表现为并发症。”

CRISPR的脱靶效应，是指CRISPR分子在靶位点以外的位点改变DNA。长期以来，这些意外的剪切，一直是设计CRISPR治疗方法的研究人员的担忧，因此EBT-101需要注意这些剪切，特别是因为该治疗方法针对基因组中的多个位点。

此外，专家告诉《生活科学》，尽管正在进行的试验表明该疗法具有积极的安全性，但我们仍然不知道，一剂是否能有效靶向潜在的HIV细胞，以及它是否能控制人类的HIV。

郝雷拉·卡里略说：“谨慎对待这件事至关重要。虽然对走上正确轨道的乐观情绪是合理的，但重要的是要认识到仍需要做大量工作。”

该临床试验接下来将测试额外剂量的EBT-101的安全性，然后确定当患者停止cART时病毒是否保持抑制状态。cART疗法为HIV复制踩下了刹车，因此确定潜在细胞库是否已被禁用的唯一方法，是暂时解除这些刹车。

中断HIV治疗对于确定患者是否处于缓解状态是必要的——正如少数治愈HIV的人所发生的那样——但总的来说，有目的的治疗中断由于其固有风险而备受争议。

在这些测试之后，EBT-101试验参与者，将在首次给药后参加为期15年的长期随访研究，以检查长期不良反应。因此数据正在路上，但需要数年时间才能得出结论。