碳水化合物 LCMSMS液质联用 的 PKa为4.5的化合物，流动相PH该怎么选择？
PKa为4.5的化合物，流动相PH该怎么选择？
PKa为4.5的化合物，流动相PH该怎么选择？

为了保证样品外，也就是最好是大于5.5或低于3.5。
另外要注意以下3个方面：
1. 所选用流动相一定要能将峰检出——这个是基础条件，相信大家都知道。
2. 流动相如为缓冲液，它的pH值应在它本身PKa的上下1个pH值内，如超出此范围，缓冲作用将大大减弱。
3. 一般检测柱是C18，但使用C18柱时，流动相的pH值应在2~8之间，否则对柱子伤害较大。
根据以上要求，请选择适合自己实验的流动相。
c18反相柱对非极性的物质保留充分峰形对称，所以如果你的化合物是弱酸，记得好像流动相pH<pKa-2时，弱酸就会基本以游离态存在，呈非极性，达很好保留出很好峰形！所以你的流动形相就的选择2~2.5
当溶液PH值等于化合物的pKa时，化合物半解离。在pKa±1.5的范围内，保留随PH值的变化而变化，超过此PH值范围，化合物完全解离或不解离，保留随PH值的变化很小。
了解化合物的pKa值，可在pKa±1.5的范围内调节流动相的PH值，以改变其保留，达到成分分离的目的。或者，使流动相PH值超出这一范围，以保持保留的恒定，使建立的方法具有耐用性。
可参考《药物分析》化学工业出版社，盛龙生等 P235～237
谢谢楼上各位的热心解答，但你们讲的都不大一样，我该怎么确定呢？
根据分析化学,当弱酸(弱碱)溶液中溶液中离子浓度是分子浓度的100倍时,可以认为是完全电离的,化合物完全以离子形式存在;当弱酸(弱碱)溶液中溶液中分子浓度是离子浓度的100倍时,可以认为是完全不电离的,化合物以分子形态存在.

因此,为了防止HPLC中峰的拖尾,应当保证化合物全部以分子或离子形态存在,即溶液的pH 值应与pKa有2个单位的差别(pH≥pKa±2).如果化合物的pKa是4.5,溶液的pH值至少应该是2.5或6.5.

考虑到色谱柱的耐受性(pH=2~8; 甚至是2.8~4.5)\保留时间\样品的复杂性要求,理论上你可以选择低pH值的流动相(pH2.5),也可以选择高pH值的流动相(pH6.5).至于最终选哪一个,做个对比就ok了.

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流动相调pH 样品pKa http://www.baidu.com/s?wd=%C1%F7%B6%AF%CF%E0%B5%F7pH+%D1%F9%C6%B7pKa p1n1
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