【实验原理】

用紫外分光光度计，在波长276nm处，分别测定试样溶液和用皮粉吸除单宁酸后的非单宁溶液的吸光度。其差值与标准单宁酸溶液的吸光度对比。

【实验流程】

1、    取称量瓶一个，将其洗净干燥至恒重，准确称量磨碎后的单宁酸样品 1.0000g，记录数据G0。然后置于105±2℃的恒温干燥箱中烘干。

2、    待一定时间之后，将其转入干燥器中冷却至室温，然后称重，重复进行至恒重,记录数据G1。

3、    计算样品的干燥失重（X1）以重量百分数表示，并按如下式计算。

X1=（G1/ G0） * 100%

4、    用50ml小烧杯取少量蒸馏水约20ml，放入60℃～70℃的恒温干燥箱中进行加热。

5、    待加热完成之后，取已经烘干至恒重的0.1000g标准单宁酸加入其中，记录数据G1,使其充分溶解。（注：由于单宁酸量少，在称量和溶解的过程中，需仔细操作，防止其发生质量丢失。）

6、    待溶解完全之后，仔细将溶液完全转入100ml的容量瓶中，冷却至室温后用水稀释至容量瓶刻度，摇匀。此时，得到标准单宁酸溶液A，1ml中含有标准单宁酸约1mg。

7、    称取磨碎之后的单宁酸样品0.1000g，记录数据G0,并按照步骤4、5、6进行操作，得到试样溶液B。

8、    用移液管取标准单宁酸溶液A 2ml（实操：2.5ml），转入200ml（实操：250ml）的容量瓶中，用水稀释至容量瓶刻度，摇匀。得到标准单宁酸的工作溶液C。

9、    用移液管取试样溶液B 2ml（实操：2.5ml），转入200ml（实操：250ml）的容量瓶中，用水稀释至容量瓶刻度，摇匀。得到试样的工作溶液D。

10、 高岭土应符合下述要求，1%高岭土水悬液的pH值在5.0～6.0。称取5g高岭土，加入到200ml0.01mol/l醋酸溶液中，震荡、摇匀、过滤（实操：两层滤纸抽滤。），并用蒸馏水多次洗涤，直至最后一次洗液蒸干后残渣不超过5mg，然后将土干燥。待干燥完全之后，将土置于研钵中研磨。收集研磨过后的土样，转入10%的盐酸中煮沸两小时，过滤，并用蒸馏水多次洗涤，除去氯离子，最后将土干燥。

11、 用移液管取试样溶液B 50ml（实操：25ml），转入250ml干净的试剂瓶中，加入4.00～5.00g高岭土（铬皮粉），塞好瓶塞，用力摇匀，将瓶放到旋转振荡器上，振荡15min左右。

12、 然后用两层中速滤纸干过滤，得到滤液，用移液管吸取2ml（实操：2.5ml）滤液，转入200ml（实操：250ml）容量瓶中，用水稀释至容量瓶刻度，摇匀。得到非（无）单宁工作溶液E（对试样的测定起对照作用，减去试样中杂质的干扰）。

13、 将上述工作溶液C、D、E在紫外分光光度计波长276nm处，用1    cm石英比色皿，用蒸馏水作参比校零，分别测定吸光度。

14、 计算结果，单宁酸含量（X2）以干基计，用重量百分数表示，并按如下式计算。

式中： A0：试样的工作溶液D的吸光度；

A1：标准单宁酸的工作溶液C的吸光度；

A2：非（无）单宁工作溶液E的吸光度；

G0：试样重量，g

G1：标准单宁酸重量，g

X1：试样测定的干燥失重，%