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Western Blotting——电转移

(2013-05-06 14:31:14)

1、半干转

切去多余的胶,裁剪滤板至胶大小,一共裁剪12块,上下各6块。裁剪NC膜或PVDF膜至胶大小,放入电转液中侵泡5min,铺板时,从下往上分别是6层滤板,一层NCPVDF膜,胶,6层滤板,注意不要有气泡,可用磙子推一下,把气泡压出。使用PVDF膜的时候需要注意先在甲醇中侵泡5min

电流大小应是胶面积的两倍,时间为1个小时。

2、湿转

切去多余的胶,裁剪滤板至胶大小,一共裁剪6块,上下各3裁剪NC膜或PVDF膜至胶大小,放入电转液中侵泡5min,铺板时,从负极往正极分别是3层滤板,一层NCPVDF膜,胶,3层滤板,使用PVDF膜的时候需要注意先在甲醇中侵泡5min。电转槽中电转液需没过胶,需加入冰块降温。300mA的电流,时间为1h

转好后取出NC膜或者PVDF膜放入1X丽春红中染色2min

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