试剂盒试用报告

试用过程与结果

实验名称：探究温度对酶活性的影响。

实验原理：

1、本实验是一个探究性的实验，实验变量就是不同温度，反应变量就是过滤出的果汁的体积。在实验过程中，要注意控制果胶酶的用量、PH、酶催化反应的时间、苹果泥的用量等无关变量对实验的影响。

    2、果胶酶活性受温度影响。处于最适温度时，活性最高。果肉的出汁率、果汁的澄清度与果胶酶的活性大小成正比。

实验仪器及材料：研钵（杵）、温度计、试管（带刻度的）、烧杯、玻璃棒、量筒、漏斗、滤纸。苹果、蒸馏水、果胶酶、开水，恒温箱。

实验步骤（含操作过程照片）：

（1）制备苹果泥和配制果胶酶溶液（如图①②）：

（2）将分别装有苹果泥和果胶酶溶液的试管在恒温水浴中保温：在六支试管中分别取2毫升苹果泥置于20℃、30℃、40℃、45℃、50℃、65℃等不同水浴温度下。再在六支试管中分别取2毫升果胶酶置于相对应的水浴温度下（如图③④）。

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（3）苹果泥和果胶酶混合水浴恒温：将6组不同温度梯度下果胶酶分别加入相对应的相同温度下的苹果泥的试管中，继续在原烧杯中水浴恒温，并快速调节好温度尽量使其保持恒温（如图⑤所示）。让苹果泥在果胶酶的作用下反应一段时间。

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    （4）过滤果汁：将试管中的混合物过滤，并用量筒测量果汁体积，比较不同温度下果汁的多少。

实验结果：不同温度下的试管内苹果泥和果胶酶混合液在相同的一定时间后进行过滤得到果汁滤液，其结果如下图⑥和表⑦所示：

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实验结论：据上述实验和得到实验结果分析可知：

一定范围内随温度的升高，苹果的出汁量渐增，从而果胶酶活性渐渐增强；当超过一定的温度范围时，继续升高温度，苹果的出汁量渐渐减少，从而果胶酶的活性反而渐渐下降（如图⑧所示）。

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结果分析：

   （1）在不同温度梯度的水浴反应结束后，不同温度处理的试管混合液中过滤所得的澄清果汁体积各异，表明果胶酶在不同的温度下活性是有差异的，

（2）从图中曲线可以明显的观察到，在其他反应条件一致时，果胶酶的活性从20℃---45℃由低到高明显增强，至45度达到活性高峰，至50℃时活性小幅度降低，在65℃时，过滤所得果汁量极少，表明苹果泥中大部分的果胶都没有能够降解，果胶酶几乎全部失活，并没有发挥降解作用。

（3）实验结果可能出现误差的原因：a，因没用恒温箱，所以温度难以控制，不能保证准确的恒温。b，过滤不彻底也有可能导致不同组温度下的果汁量不同。c，先与后过滤的也有可能有影响，因最初过滤的滤纸会吸收少许。d，实际操作中苹果泥与果胶酶混合的时间难以保证各组是相同。

实验注意事项：

1、为了保证实验结果的准确性，应注意整个实验过程中注意只保持一个实验变量，其它的如果胶酶的用量，苹果泥的来源和用量，水浴保温时间及PH值甚至试管规格等均应保持不变或相同。

2、为了保证底物和果胶酶在混合时的温度是相同的，避免苹果泥和果胶酶混合时影响混合物的温度，从而影响果胶酶活性。必须在苹果泥和果胶酶混合之前要将它们分装在不同试管中恒温。

3、为了体现了不同温度下酶的活性，实验中须设置不同温度梯度进行实验以作为实验的相互对照。

使用试剂盒心得

使用试剂盒好现成的果胶酶较从其它的植物、霉菌、酵母菌和细菌等生物中提取较方便，减少了提取的步骤和难度，这样用起简便快捷。当然难免存在使用期限，超过保质期便或将失去活性。

试剂盒的改进意见：

果胶酶最好分二种情况配备：一种可以为固体，另一种为用小塑料试管配制好的不同浓度的酶溶液。到时可以任由教师和学生在实验时按所需浓度进行自由选用。因这样的配备可以为老师的实验准备节省很多的时间，同时可以减轻老师和学生的实验任务且提高实验用量等的精确性。

湖南省汝城县第二中学  宋平京   

邮编   424100

2013年3月14日星期四