试剂盒试用报告

试用过程与结果

实验名称：PCR及琼脂糖凝胶电泳

实验仪器及实验材料：

全自动基因扩增仪、电泳仪、微量可调移液器、PCR试剂盒、琼脂糖。

实验步骤（含操作过程照片）：

（1）配置预混液，离心。（如图1）

（2）扩增.（如图2）

进行PCR时，做了两个对照实验，第一个，按照指定比例加入了dNTP和聚合酶，没有添加模板，作为阴性对照。第二个，没有用石蜡蜡封，对比结果。

（3）配制琼脂糖凝胶、倒胶。（如图3）

（4）产物中加入6*laoding buffer和核酸荧光染料，再离心。（如图4）

（5）点样、电泳10分钟。（如图5、6）

实验结果（实验结果照片）：（如图7）

左边就是用DNA电泳图谱观察仪看到的电泳结果。最两边四道是刚开始滴加的，电泳时间最长，跑的最远。

从右往左数第三道加的是阴性对照。从右往左第四五两道是没有加石蜡的那支，注意看！它比其他的都亮！第六道空白。第七道跑的比其他同时添加的更快点，看着也更整齐一点。第八九道就是正常扩增的了。

实验结果分析：

1.有石蜡蜡封的条带反而不是很亮，原因可能是吸取产物时吸出了石蜡，干扰了荧光反应。所以建议对于蒸发量小的，较先进的仪器，可以不用石蜡，防止对结果的干扰。

2.对于一般的扩增来说，不要电泳时间过长，看出显著特点即可。不然条带分离现象明显，会影响观测（例如最两边的条带，电泳时间长，但几乎都成一团了）

3.一定要注意PCR的阴性对照，防止污染。本次试验未出现污染。

4.点样结束后用吸水纸吸取胶上溢出的溶液，如果残留在跑道会影响结果。

5.本例中4、5、7、8、9道电泳条带基本一致，阴性对照未现阳性，可以认为实验成功。

使用试剂盒心得：（使用试剂盒与传统配制试剂方法组织开展同一实验有何优势和不足）

小规格分装，使用方便，减少浪费和污染；且可快速进行实验，减轻了老师的工作量，实验效果很好。

试剂盒或仪器使用改进意见：

    建议一些配制成溶液后不稳定的试剂按固态分装，这样不但延长试剂盒的使用期限，也可减少运输途中漏液情况的发生，同时可以缩小包装盒，节省储藏空间。