试剂盒试用报告

试用过程与结果

实验名称：DNA的粗提取与鉴定

实验原理：

1. DNA在NaCl溶液中的溶解度是随着NaCl的浓度的变化而改变的。 当NaCl的物质的量浓度为0.14

mol／L时,DNA的溶解度最低。利用这一原理，可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。

　　2.DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA。

　　3.DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。

实验仪器及实验材料：

研钵、天平、漏斗、纱布、烧杯、酒精灯、玻璃棒、试管、试管夹、95％无水乙醇、香蕉

实验步骤（含操作过程照片）：

1.材料准备：用天平秤取香蕉20g，将香蕉切成小块放入研钵中（如图①）。

2.制备滤液：从试剂盒中将研磨液取出，取3mL研磨液加入研钵中，与香蕉研磨充分。研磨至半流体状态时，将研磨的香蕉糊用漏斗和一层纱布过滤到烧杯中（如图②）。

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3.提取DNA：在上述香蕉提取液中，加入与滤液体积相等的4℃冷却的95％无水乙醇。静置1-2min，用玻璃棒朝一个方向轻轻搅拌，就会看到大量白色纤维状粘稠物从溶液中析出，用玻璃棒轻轻卷起（如图③）。

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4.鉴定DNA：将试剂盒中的二苯胺试剂B全部取出加入到A中混匀。取两支试管，各加入2mol/L的NaCl溶液5m，将丝状物放入其中一支试管中，用玻璃棒搅拌，使丝状物溶解。然后向两支试管中各加入4mL的二苯胺试剂。混合均匀后，沸水浴10min，观察结果（如图④⑤）。

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实验结果（实验结果照片）：

实验结果如图：

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实验结果分析：

在沸水浴的条件下，加丝状物的试管（含DNA）遇二苯胺被染成蓝色，而对照组无变色现象。实验过程中，由于香蕉研磨液不易过滤，可加少量蒸馏水，并挤压纱布。

使用试剂盒心得：

课本上传统的实验方法采用鸡血，需要过滤很多遍，学生操作太麻烦，且时间明显不够用。而使用香蕉等植物则明显简化实验过程。使用试剂盒之后确实为老师的实验准备节省很多的时间，方便学生操作，减轻了老师的实验任务。而且，试剂盒配制出的试剂实验效果明显，提高实验成功率。

试剂盒或仪器使用改进意见

试剂盒的量少，学生若操作失误则没有充足的试剂使用，可适当增加试剂量以备用。

海南省海口市第一中学  尹翱翔、陈小燕  

2013年3月28日星期四