I、咸水培养基A+(适合单细胞Synechococcus sp. PCC 7002等蓝细菌生长)
储存液:A 100×Tris-HCl 100g/L pH8.2,B 1000×FeCl3·6H2O 38.9 mg/L,C
500×EDTA·Na2 15g/L
pH8.2,D 1000×Trace metal mixture:H3BO3 2.86 g/L,
MnCl2•4H2O 1.81 g/L,
ZnSO4•7H2O
0.222 g/L, Na2MoO4•2H2O 0.390 g/L,
CuSO4•5H2O 0.079 g/L,
Co(NO3)2•6H2O 0.0494 g/L。
固体试剂:A MgSO4·7H2O,B KCl,C NaNO3,D NaCl,E
BACTO Agar(西班牙产)。
无菌储存液:A 1000×CaCl2 270 g/L;B
1000×KH2PO4
50g/L;C 1000×Na2CO3
20g/L,D
VB12(均在4℃储存)
配制1升培养基步骤:
1、在干净的三角瓶中称取15g MgSO4·7H2O,20.6g KCl,31g NaNO3和418g NaCl。
2、加入一定的纯净水溶解完成后,添加A 100×Tris-HCl,B 1000×FeCl3·6H2O,C
500×EDTA·
Na2,D 1000×Trace metal mixture。定容至1升,高压灭菌。
3、灭菌结束,再加入A 1000×CaCl2,B
1000×KH2PO4,C 1000×Na2CO3和D 4ug/L的VB12。
4、配制固体培养基的时候,为了避免高压灭菌时产生有害物质,需要将液体培养基和1.2%Agar分开灭
菌。准备两个三角瓶,一个瓶中配制2×的液体培养基,另一个瓶中配制2×的Agar。倒平板的时候,
再将两个灭好菌的2×培养基混匀。
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