动物交叉配血试验

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一、概述 

    交叉配血实验用于检测贫血的受血者和供血者之间的血清型是否相容，用以预防受血动物输血后发生输血反应。

1．主测配血试验是检验受血者血清中是否有抗供血犬的红细胞抗体，如果有则不能输血。

   主测配血试验：受血者血浆+供血者红细胞

2．副测配血试验是检验供血者血清中是否有抗受血犬红细胞抗体，即使有也可以忽略，因为供血者血液进入受血者体内后很快被稀释。

    副测配血试验：供血者血浆+受血者红细胞

3．多数犬不存在自然产生的抗体，因此从未输过血的犬初次交叉配血试验显示相容性。

4．曾经有受血经历的犬，在第二次输血前，即使用同一供血犬，也一定要做交叉配血试验。

5．猫能产生自然同种抗体，所以在猫输血前必须做交叉配血试验。交叉配血试验还能鉴定猫的血型，若主测配血试验不相合，受血猫可能为B型血，供血猫为A型血。若副测配血试验不相合，受血猫可能为A型血，供血猫为B型血。如果交叉配血试验相合，则供血猫和受血猫血型相同。猫的血液最好在需要输血时，现采血现输血，不要长期贮存。

二、步骤（仅供参考）

1)       分别取0.5毫升受血者和供血者的抗凝血，可用EDTA抗凝，或从供血袋内取血；（见下图）

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2)        对抗凝血进行离心，2000转/ｍin，离心5ｍin；（见下图）

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3)        离心后，用移液枪吸取上面血浆，放入另外试管，并标记；或直接转移入贴有主测、副测和受血者对照标签的3支1毫升离心管中，每支离心管中加对应血浆100微升。（见下图）

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4)        用磷酸盐缓冲盐水或生理盐水洗涤红细胞3遍，并制成5%的红细胞悬液。操作方法为：加入洗涤液后，用手指轻弹试管底，使红细胞和洗涤液混合，再2000转/ｍin离心5ｍin，取上清液仍掉，如此重复3次；（见下图）

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5)        向装有100微升血浆的离心管中各加入100微升对应的5%红细胞悬液，并在室温下静置15分钟；（见下图）

主测配血试验：100微升受血者血浆+100微升5%供血者红细胞悬液，轻轻混合

副测配血试验：100微升供血者血浆+100微升5%受血者红细胞悬液，轻轻混合

对照试验：    100微升受血者血浆+100微升5%受血者红细胞悬液，轻轻混合

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6)       离心后，检查上清液有无溶血；（见下图）

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7)       轻轻晃动离心管，肉眼或借助显微镜观察有无凝集；（见下图）

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8)       主测配血试验出现任何程度的溶血或凝集都表示血型不合，副测配血试验出现轻微溶血或凝集可用于紧急情况下的输血，但是必须仔细监护；

9)        当受血者对照试验出现凝集或溶血后，不应进行交叉配血。

三、结果判读

相容现象（400倍镜）

凝集现象：可见红细胞凝集，凝块大小可能会有差异。（见下图，100倍镜、400倍镜）

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交叉配血试验无凝集时才可以输血。

四、备注

    要使用磷酸盐缓冲盐水或生理盐水洗涤红细胞，输血时最好使用生理盐水稀释。

5%葡萄糖对红细胞的伤害(见下图)

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蒸馏水对红细胞的伤害（见下图）