关于流动相中加入离子对试剂的问题

《应用色谱技术问答》之液相色谱篇-作者-施超欧(恐龙)

关于流动相中加入离子对试剂的问题
问：在流动相中加入如庚烷基磺酸钠、十二烷基硫酸钠等离子对试剂，它是如何增加相关物质的保留性质的？还有，流动相中有这些物质是否对色谱柱有损害，且不易冲干净？盐浓度、pH

值对离子对色谱分离情况的调节作用有何影响？

答：流动相中加入离子对试剂后，它可以与被分析物（多为在溶液中带与离子对试剂相反的电荷）结合成离子对而呈电中性，这样非极性就表现出来，从而增加了在反相色谱柱上的保留作

用。这种分离模式叫做反相离子对色谱。

常用离子对试剂有两大类：四丁基铵磷酸盐和烷基磺酸的盐类。四丁基铵盐在pH值等于7.5的条件下与强酸和弱酸形成离子对并具有缓冲抑制弱碱的作用；多烷基磺酸盐在pH值等于3.5的条

件下与强碱和弱碱形成离子对并缓冲抑制弱酸离子。

在反相离子对色谱体系中影响流动相对溶质保留和分离作用的因素主要有三个方面，即流动相组成、对离子的浓度、有机改性剂。

反相离子对色谱常用的流动相是以水为主体的缓冲溶液，其pH值对分离的影响最大。因为流动相的酸碱度决定了被分析物的解离状态。从而影响其与对离子的结合程度。因此，改变流动相

的pH值是改善分离选择性的有效方法。

对离子的浓度是影响保留的主要因素，增加对离子的浓度可以增加保留作用。

以水为主体的流动相中通常添加极性有机溶剂，如甲醇、乙腈等作为改性剂。其作用是改善缔合分子在两相中的分配，同时对某些化合物，如肽的离子化程度也有影响。在流动相中添加无

机盐，如硫酸钠，会改变其选择性和保留时间。

流动相中的盐及对离子的浓度对柱填料寿命有一定的影响，因此使用后应先用水冲洗较长时间。