七、    CpG乙肝疫苗：远远被低估的重磅品种。

 

7.1 CpG乙肝疫苗简介

 

2011年7月底药监局对沃森公司申请的CpG ODN乙肝疫苗召开的专家评审会议圆满结束。可以说沃森的CpG乙肝疫苗距离成功又进了一步。

乙型病毒性肝炎是由乙肝病毒引起的一种流行疾病。据统计全球已经有20多亿人经历了HBV感染，其中有3.5亿人为慢性HBV携带者，我国占1.2亿，约4%。每年有50-120万HBV感染者死于慢性肝炎、肝硬化和肝细胞癌。

为预防乙肝我国大规模接种乙肝疫苗进行干预。接种疫苗结果证明病毒携带率减少了85%-90%，从10%下降到了2%左右。但还是有10%-5%接种疫苗者乙肝表面抗体为阴性或者达不到保护阈值，表现为免疫无应答或者免疫低应答。

CpG脱氧寡核苷酸（CpG ODN）是以非甲基化的CpG二级核苷酸为核心的，具有免疫刺激作用的核苷酸序列。CpG ODN能促进B细胞增殖分化并分泌IL-6，从而诱导抗体的分泌；激活单核细胞，巨噬细胞，诱导产生细胞免疫。

沃森生物的CpG乙肝疫苗，采用了CpG ODN作为自己开发的重组汉逊酵母乙肝疫苗的佐剂，以达到在短时间内显著提高乙肝抗体产生水平的目的。以使免疫无应答或者免疫低应答者表面抗体转阳，达到保护阈值。但是这并不仅仅是CpG ODN乙肝疫苗的全部潜力。

 

7.2 沃森CpG乙肝疫苗研究进展

 

根据沃森生物科研人员今年3月份在免疫学杂志上发表的论文《CpG ODN联合乙型肝炎疫苗与乙型肝炎疫苗免疫效果对比研究》中公布的资料，可以看到沃森CpG乙肝疫苗的最新动物实验结果。

实验结果显示：实验组第28天抗-HBs抗体水平是对照组的114倍以上，第63天实验组抗-HBs抗体可高达30000mIU/ml,是对照组的5倍以上。说明与市售乙型肝炎疫苗相比，CpG ODN佐剂乙肝疫苗能刺激机体快速产生抗-HBs抗体，且抗体水平远远高于对照组。这样出色的结果为CpG乙肝疫苗接下来的临床实验打下了很好的基础。

7月底，国外另外一家开发CpG乙肝疫苗HEPLISAV的Dynavax公司公布了III期临床试验结果。

在这次试验中共有2449名健康成人参加，分别注射CPG乙肝疫苗Heplisav和GSK的乙肝疫苗Engerix-B。使用Heplisav疫苗的受试者间隔一月注射两针，使用Engerix-B的受试者6个月里注射三针。Dynavax表示注射Heplisav的受试者有超过90%的抗体转阳率，大大高于GSK公司Engerix-B受试者70%的抗体转阳率。

Dynavax公司的成功从另外一个方面证实了沃森CpG乙肝良好的开发前景。

 

7.3 CpG治疗性乙肝疫苗的开发潜力

  

沃森公司在最新公布的论文结尾写出了这样一句话：“可见，CpG ODN乙肝疫苗不仅能刺激机体提高乙肝疫苗的免疫刺激作用，同时可以提前抗体产生时间，这将有助于高危人群及低免疫应答的人群防御乙肝病毒的感染，增强疫苗的保护作用，且对治疗性乙肝疫苗的开发具有重要的意义。”此外请注意，沃森CpG ODN乙肝疫苗的注册分类为生物制品第3类基因治疗、体细胞治疗及其制品。这又意味着什么呢？

    说到这里就需要了解治疗性乙肝疫苗的作用机理如何，CpG ODN乙肝疫苗又为何具有成为治疗性乙肝疫苗的巨大潜力。

 

7.3.1 重庆啤酒多肽治疗性乙肝疫苗的机理与CpG ODN乙肝疫苗的比较。

   

7.3.2 治疗性乙肝疫苗设计的理论基础

 乙肝病毒感染后，如果处于活跃期，临床上通常称为“大三阳”，感染病毒的病理细胞会释放大量的病毒抗原，这些抗原中的表面抗原会激活免疫系统，召集免疫细胞，发生免疫反应；E抗原则会影响免疫系统，使免疫系统在分化上失去原有的平衡。 

人体免疫系统包含两大互相遏制的子系统：细胞免疫系统和体液免疫系统。

 

          细胞免疫：主要负责对细胞结构的生物体进行识别攻击和清除。

 

          体液免疫：主要负责对游离于体液之内的非细胞结构的生物大分子进行识别中和和清除。

 

细胞免疫和体液免疫系统的相关细胞会分泌不同的蛋白质，临床上称为细胞因子，

这些因子能够遏制对方系统末端细胞的分化和活化。也就是说在正常情况下细胞免疫与体液免疫系统在数量与活性方面处于平衡状态。

 

E抗原的大量释放，直接影响了人体免疫系统的失衡，在大三阳病人体内，E抗原改变了人体的免疫系统结构，细胞免疫系统的数量与活性被大幅下调了。细胞免疫负责对细胞结构的生物体进行识别攻击和清除，能够识别感染病毒的病理细胞并进行清除。如果细胞免疫被下调，大三阳病人的病理细胞将无法得到清除，这将导致病毒无法被彻底清除。而表面抗原引发的体液免疫反应，无法根除病理细胞，无法彻底阻止病毒抗原的持续释放，这将导致持续的体液免疫发生，这是乙肝慢性化的主要原因。

 

所以，激发患者的细胞免疫系统，打破免疫耐受。刺激机体产生对乙型肝炎病毒特异的CD8+细胞毒性T淋巴细胞（CTL）破坏病毒感染的肝细胞或分泌抗病毒的细胞因子而清除病毒，是设计治疗性乙肝疫苗的理论基础。

 

7.3.3 重啤治疗性乙肝疫苗设计思路

 

重庆啤酒旗下子公司重庆佳辰生物投资的多肽型治疗性乙肝疫苗，主要成分是45个氨基酸的多肽，通过化学合成的方式制备，使用直接注射的方法打入静脉。这45个氨基酸分别编码了三个抗原表位（所谓表位，是一串大于9个氨基酸的多肽，是能够刺激免疫系统发生反应的最小多肽片段）：

 

        PreS2蛋白的B细胞表位：刺激形成抗体，中和体液中的游离病毒。

 

          Core蛋白的CTL细胞表位：刺激形成细胞毒性T淋巴细胞。

 

          破伤风杆菌肉毒素的Th细胞表位：调节免疫系统向受抑制的细胞免疫分化。

 

现在重庆啤酒治疗性乙肝疫苗的临床试验正在进行中，不断有传闻说其取得了明显进展。

 

7.3.4 沃森生物CpG乙肝疫苗在试验中表现出的潜力

   

 研究分析重庆啤酒治疗性乙肝疫苗不难发现，其设计机理主要是以下三点：

 

（1）刺激机体形成抗体，

（2）刺激机体形成细胞毒性T淋巴细胞（CTL细胞），

（3）调节免疫系统增强细胞免疫分化。

 

仔细检视沃森生物CpG乙肝疫苗试验数据不难发现，CpG乙肝疫苗在以上三项上都表现出了良好的效果。

 

强大的刺激机体形成抗体能力：实验数据显示，试验组第28天抗-HBs抗体水平是使用普通乙肝疫苗的对照组的114倍以上！如此强大的刺激机体形成抗体的能力，远远超出所有已知的预期。相信也会远远优于重啤PreS2蛋白的B细胞表位的刺激能力。 能够在治疗性乙肝疫苗使用过程中（重啤临床方案分别需注射6针与15针），大大压制体液中的游离病毒。

 

明确的刺激细胞免疫应答能力：国内外多家机构的研究结果都明确表明，CpG佐剂乙肝疫苗能够刺激机体产生Th1途径的细胞免疫反应。（Th1细胞：介导细胞免疫；Th2细胞介导体液免疫；两者相互抑制。）

普通乙肝疫苗（比如酿酒酵母疫苗）主要产生Th2途径的体液免疫应答，并在此过程中对Th1途径细胞免疫应答产生明显的抑制作用。而Th1途径细胞免疫应答正是清除乙肝病毒的关键因素。

检验两种途径免疫应答的特征性标志分别是IgG1(表明机体产生的是Th2体液免疫应答)，和IgG2a(表明机体产生的是Th1细胞免疫应答)。在吉林大学和许多国外研究机构进行的实验中都清晰的证实了CpG乙肝疫苗刺激机体细胞免疫的能力。请看以下实验数据图表。

 

图表 28 实验开始4周后，普通乙肝疫苗组（HB）仅仅检测到了微量的IgG1,CPG ODN组检测到了大量IgG2a。

图表 29 实验开始8周后，普通乙肝疫苗组仅检测到微量IgG2a，而CPG ODN组较4周时又增高了一倍。

 

    多个研究中心进行的类似实验都出现了以上的相似结果，证实了CpG ODN乙肝疫苗能够刺激激活Th2途径的细胞免疫应答反应，有效活化细胞免疫，刺激产生很强的HBsAg特异性的细胞毒性T淋巴细胞杀伤反应（CTL），而这正是重庆啤酒治疗性乙肝疫苗中Core蛋白的CTL细胞表位和破伤风杆菌肉毒素的Th细胞表位所要达到的目的。

 

7.3.5 沃森CpG治疗性乙肝疫苗成功几率

    

沃森CpG乙肝疫苗已经在药监局审批中获得了明显的进展。如果CpG乙肝疫苗获批进行临床实验，相信沃森也会立即启动CpG治疗性乙肝疫苗的研发。

国外开发CpG乙肝疫苗的Dynavax公司在积极推进自己公司CPG乙肝疫苗HEPLISAV的同时，也开始进行了CpG治疗性乙肝疫苗DV-601的临床试验。目前这种新药的1b期临床实验已完成且实验数据已公布。

在试验中Dynavax公司研究人员采用剂量递增方式给14名慢性乙型肝炎患者注射了三针试验用疫苗；14名患者中有6名HBeAg e抗原阴性，8名HBeAg e抗原阳性（慢性乙肝一般依据HBeAg检测结果阳性阴性分为两型）。试验结果如下：

 

 

1. 这种疗法安全并且受试者能够忍受各种剂量带来的不良反应。
2. 大多数受试者的全身反应是疲劳和不适。没有SAE（严重不良反应）。
3.  试验中三种不同剂量的DV601疫苗都能够激发免疫系统应答，8名HbeAg表面抗原阳性患者中有2人产生抗HBe抗体（E抗体表示病毒是否抑制，阳性就是被抑制）。
4. 14名患者中4人出现HBsAb表面抗体。
5. 8名HBeAg表面抗原阳性患者中有2人HBeAg E抗原阳性转阴，并且其中一人的HBsAg表面抗原转阴。
6. 有3位患者继续观察治疗。

 

实验数据显示，受试者对这种新疫苗的耐受性良好，他们接种不同剂量的疫苗之后体

内免疫原性和病毒反应方面的情况均非常良好。

 

在这里先介绍下慢性乙肝治疗中经常有人提到的金银铜牌概念。

  

 

•    乙肝病毒DNA转阴             铜牌  （限制病毒复制）
• 
  
•            乙肝e抗原转阴(HBeAg)        银牌  （稳定病情）
• 
  
•    乙肝表面抗原转阴(HBsAg)      金牌  （乙肝治愈）

 

重庆啤酒正在开发的多肽疫苗，2003年开始I期临床试验到现在为止历时8年，参与试验人数数百人，试验设计中每疗程注射疫苗6-15针，并与恩替卡韦联合用药。至今为止还未见公司正式报道有一例患者获得金牌。

    而在参与DV-601治疗性乙肝疫苗临床试验的8名HBeAg表面抗原阳性患者中有2人HBeAg E抗原阳性转阴获得了银牌，其中一人的HBsAg表面抗原转阴获得了金牌！而这仅仅是在注射了三针DV-601疫苗，并且没有联合运用其他药物时就出现的结果，不能不让人对治疗性CpG乙肝疫苗的强大效果感到震惊！

Dynavax公司公司同类型治疗性乙肝疫苗的顺利推进，也从另外一个侧面证实了CpG治疗性乙肝疫苗的潜力。

我们可以得出一个大胆的推论：因为CpG乙肝疫苗是一种生产工艺相对简单的佐剂疫苗，又具有强大的刺激抗体生成能力和刺激细胞免疫能力。相信沃森生物CpG治疗性乙肝疫苗一旦研发成功，将成为一款比重啤治疗性乙肝疫苗更廉价、更有效的疫苗新产品。

 

7.4 沃森CpG佐剂疫苗市场前景分析

 

沃森正在申请临床批件的CpG预防性乙肝疫苗主要目标人群是普通乙肝疫苗免疫无应答人群，市场上同类产品是深圳康泰公司60µg重组乙型肝炎疫苗（酿酒酵母）。

普通乙肝疫苗剂量分别为5µg和10µg,深圳康泰的这种疫苗与普通酿酒酵母疫苗成份没有明显区别，只是将剂量加大到了成人常用剂量10µg的六倍。

该产品内在的设计逻辑是：接种效果与疫苗含量呈正比，5µg不行就用10µg，10µg不行就用20µg，20µg不行就用60µg。简单来说就是：不打出抗体不罢休。但事情恐怕没有那么简单，在某个剂量内可能是剂量与效果呈正比，但并非所有剂量都是如此。一般来说接种两轮乙肝疫苗（即6剂次，第1轮5µg第2轮10µg，或2轮都是10µg）还不产生抗体的话，医学界相关研究就认为这是个人体质原因难以产生应答。

我们来看看深圳康泰60µg乙肝疫苗的临床试验结果：

 

图表 20 深圳康泰60ug乙肝疫苗转阳率

 

用60µg这么大的剂量注射三针后参加试验患者抗-HBs转阳率可以达到92.79%。仍然有7%的受试者没有转阳。而深圳康泰60µg疫苗说明书中推荐的接种方式仅仅是先注射一针，检测后如果还未转阳，就接种第二针，也就是说无应答患者至多只能接种两针该疫苗。而接种两针的转阳率仅为89.53%。这样的效果很难说是让人满意的。

虽然试验效果还不尽理想，但是深圳康泰的疫苗已经上市，并且以该疫苗做为基础，正在开发治疗性乙肝疫苗。成份与康泰生物生产的60µg预防用疫苗一致，同属于蛋白疫苗，没有采用什么特殊技术，其原理还是利用大剂量疫苗刺激机体免疫反应。医学界对其前景并不看好。

现在深圳康泰60µg乙肝疫苗零售价为：298元/支，企业招标投标价为：200/支。与之对应深圳康泰10µg乙肝疫苗（西林瓶）投标价仅为15元，60µg价格相当于10µg价格的13倍多。深圳康泰今年1-7月份已经批签发60µg乙肝疫苗123万份。如果全部实现销售，产生销售收入将达到2.46亿元。相当于销售1640万份10µg乙肝疫苗的收入。

因为沃森CpG乙肝疫苗在技术先进性上，临床疗效上可能大大优于深圳康泰产品。依据深圳康泰产品定价推断。沃森CpG预防性乙肝疫苗上市，零售定价将不会低于300元，企业招投标价不会低于200元。也就是说该品种将很可能成为销售收入过亿的重磅品种。

 

而对于沃森CpG治疗性乙肝疫苗的预期收益。可以参考马仁辉先生深度研究报告《重庆啤酒---从神话到现实的跟踪与思考》中对重啤啤酒未来业绩与股价预测的相关计算。 

按照马先生的计算，重庆啤酒乙肝疫苗最可能的一疗程定价为3万元（效果最好的乙肝治疗药物恩替卡韦每年治疗费约为1万5千元，但是需要多年长期使用）。如果沃森CpG治疗性乙肝疫苗研发成功后每疗程定价与重啤类似。按照我国每年慢性乙肝患者新增100万人，其中50%选择利用治疗性乙肝疫苗进行治疗（不考虑3000万存量慢性乙肝患者），沃森疫苗占据市场份额1/2。沃森CpG治疗性乙肝疫苗销售额也将达到75亿元之巨。