血球计数板，通常是一块特制的载玻片，其上由四条槽构成三个平台。中间的平台又被一短横槽隔成两半，每一边的平台上各刻有一个方格网，每个方格网共分九个大方格，中间的大方格即为计数室，微生物的计数就在计数室中进行。

计数室的刻度一般有两种规格，一种是一个大方格分成16个中方格，而每个中方格又分成25个小方格；另一种是一个大方格分成25个中方格，而每个中方格又分成16个小方格。但无论是哪种规格的计数板，每一个大方格中的小方格数都是相同的，即16×25=400小方格。

　　每一个大方格边长为 1mm，则每一大方格的面积为1mm²，盖上盖玻片后，载玻片与盖玻片之间的高度为0．1mm，所以计数室的容积为0．1mm³。

　　在计数时，通常数五个中方格的总菌数，然后求得每个中方格的平均值，再乘上16或25，就得出一个大方格中的总菌数，然后再换算成1ml菌液中的总菌数。

记数中方格的方法

   下面以一个大方格有25个中方格的计数板为例进行计算：设五个中方格中总菌数为A，菌液稀释倍数为B，那么，一个大方格中的总菌数

　　因1ml=1cm³=1000mm³，

　　 (即0.1立方毫米的总数=A/5×25×B)

　　1ml菌液中的总数=A/5×25×B×10×1000=50000A×B（个）

　　同理，如果是16个中方格的计数板，设五个中方格的总菌数为A＇，则

　　 (即0.1立方毫米的总数=A/5×16×B)

　　1ml菌液中的总数=A/5×16×B×10×1000=50000A×B（个）

记数小方格的方法

计数时,如果使用16格×25格规格的计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下,右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数.如果规格为25格×16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数.

对每个样品计数三次,取其平均值,按下列公式计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数.

计算公式

(1)16格×25格的血球计数板计算公式:

酵母细胞数/ml=100小格内酵母细胞个数/100×400×10⁴×稀释倍数

(2)25格x16格的血球计数板计算公式:

酵母细胞数/ml=80小格内酵母细胞个数/80×400×10⁴×稀释倍数

注意事项

取出酵母菌的原液时一定要混匀!!

不同的移液管吸取不同浓度的菌液,不要混用!!!!

注意细节操作!!