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液相蛋白芯片技术在免疫诊断和分析领域应用进展(二)

(2010-03-17 10:20:15)
标签:

液相

细胞因子

微阵列芯片

免疫诊断

寡核苷酸

通道

健康

分类: 医学临床诊断与科研服务芯片

液相蛋白芯片技术在免疫诊断和分析领域应用进展(二)

    2、细胞因子检测与研究:应用液相蛋白芯片技术可对微量样品同时定量检测多种细胞因子。在人细胞因子的检测和研究方面,液相蛋白芯片技术的应用目前已有多篇报道。

    Skogstrand等应用液相蛋白芯片技术同时检测新生儿干血点样品(dried blood spot samples,DBSS)中25种细胞因子。新生儿炎症反应可能与脑瘫、自闭症和糖尿病等一些迟发的疾病有关,对新生儿进行炎症因子检测将有助于上述疾病的病原学研究。通常采用DBSS样品进行检测,由于样品量少,采用常规免疫学方法对一份样品难以检测多种因子。而液相芯片方法可解决这个问题。实验表明,液相芯片方法对标准品的检测回收率平均可达105,批内和批间检测偏差分别为6.2和16.0。采用液相芯片对储存20年以上的样品进行检测,仍能检测到大多数细胞因子。研究表明,液相蛋白芯片应用于检测DBSS样品中的细胞因子是可靠的,在新生儿疾病筛查方面应用潜力大。

    Gorelik等应用液相芯片检测人体中24种细胞因子的浓度水平,以研究细胞因子水平与卵巢癌早期诊断的关系。研究人员对卵巢癌早期患者、健康人群和良性骨肿瘤患者的血样,同时检测多种细胞因子和癌症抗原(CA一125)并比较其浓度水平。结果显示,CA~125以及白细胞介素IL-6、IL-8等6种标记物的浓度水平在卵巢癌早期患者和健康人血样中有显著差异。研究表明,应用液相蛋白芯片检测上述标记物的浓度变化可作为卵巢癌早期诊断的手段。

    Johannisson等u应用液相蛋白芯片方法检测猪促炎症细胞因子(proinflammatory cytokines),灵敏度可达0.18~12ng/ml。这是首次报道采用液相蛋白芯片技术检测动物体内细胞因子。

    3、抗核抗体、抗多肽抗体检测、抗体应答等免疫分析研究:Rouquette等应用液相蛋白芯片检测试剂盒定量检测了9种抗核抗体(antinuclear antibodies),并与常规ELISA和免疫荧光试剂盒相比较,对222例血清样品的检测结果表明,液相芯片方法与常规方法的检测符合率介于99.1%~100.0%。Komatsu等建立液相蛋白芯片方法,用于检测抗多肽抗体,以监测多肽疫苗的免疫应答情况;检测表明,液相芯片方法的敏感性与商品化ELISA试剂盒相当,但前者所需样品量少,检测时间缩短,成本较低。

    Khan等建立液相蛋白芯片方法,用于进行淋巴细胞胞内信号通道研究。该方法可以检测信号转导过程中T细胞和B细胞胞内发生的信号蛋白磷酸化动力学变化,从而可揭示淋巴细胞信号通道的作用机制。试验表明,液相芯片方法可同时检测多种信号蛋白的动力学动态变化过程。Williams等应用液相蛋白芯片方法检测患者血样中多种异嗜性抗体(heterophilantibodies),分析了艾滋病免疫检测中假阳性反应产生的原因,为排除假阳性反应提供了解决方法。研究人员建立了同时检测抗牛、羊、鼠以及牛血清白蛋白IgG抗体的液相芯片方法,对多例患者血清进行检测试验,结果表明,在常规检测中出现非特异性染色反应的样品,均不同程度存在上述异嗜性抗体。将样品事先与上述抗体孵育后再进行液相芯片检测或ELISA常规检测,可以排除非特异反应。

四、存在问题与应用展望

    如上所述,液相蛋白芯片由于高通量、自动化、快速、敏感以及多元化等特点,在生命科学研究中将得到广泛应用,可预见,研究、临床检验等方面的巨大需求将带动规模可观的生物芯片研发与销售市场,尤其是在临床和诊断市场上,临床检验和诊断芯片将有远大前景。

    在临床诊断方面,高质量诊断用抗原、单克隆抗体的缺乏、昂贵的研制和商业价格将是制约液相蛋白芯片开发和应用的主要因素。此外,芯片仪器设备价格较高,研究和开发人员对液相芯片技术、设备的选择和使用等缺乏足够的了解,商品化液相芯片试剂盒缺乏等,这些因素在当前都将影响到这一新兴技术的广泛应用。

    然而,液相蛋白芯片技术由于其技术特点,具有巨大的发展潜力,在目前以及将来相当时期内都将是全球分子生物学科学研究和应用领域的热点生物技术手段。液相蛋白芯片技术将日臻成熟完善,成本将降低,各种诊断和研究用液相蛋白芯片的商业化生产,以及液相蛋白芯片技术服务市场的形成指日可待。【提供服务:生物芯片整体解决方案、兽药残留芯片检测系统;生物芯片扫描仪等仪器;耳聋基因芯片、乙肝病毒耐药检测芯片、抗核抗体检测蛋白质芯片、结核分枝杆菌耐药检测芯片、G+细菌鉴定与耐药检测基因芯片等;食源性致病微生物检测试剂盒、兽药残留芯片检测试剂盒等;HLA基因分型检测方案、血小板基因分型;人类全基因组寡核苷酸微阵列芯片服务、家蚕全基因组寡核苷酸微阵列芯片服务、人肿瘤相关基因寡核苷酸微阵列芯片服务、miRNA微阵列芯片服务、DNA甲基化谱检测寡核苷酸芯片服务等;合作共建研究中心服务、生物芯片实验室建设服务、科研课题研究服务;糖尿病超强化治疗技术应用项目合作。请联系索取详细产品和服务介绍资料:医学与生命科学服务中心暨虫洞(北京)卫生科技有限公司,戴天岩  主任、总经理,手机:13051069337,E-mail:davad311@126.com,msn:davad311@hotmail.com,qq:104974415,虫洞医学与生命科学网http://blog.sina.com.cn/cnyr

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