二苯胺试剂A液：1.5g二苯胺溶于100mL冰醋酸中，再加1.5mL浓硫酸，棕色

瓶保存

          B液：体积分数为0.2%乙醛溶液

实验前将0.1mLB液加入10mLA液中，现配现用。

0.015mol/L的NaCl：0.88gNaCl加蒸馏水至1000mL，完全溶解

2 mol/L的NaCl溶液：117gNaCl，加蒸馏水至1000mL

1.取质量浓度为0.1 g/mL（10%）的柠檬酸钠溶液100 mL，置于500 mL烧杯中，注入新鲜的鸡血（约180 mL），同时用玻璃棒搅拌，使血液与柠檬酸钠溶液充分混合，以免血液凝结。将烧杯中的血液置于冰箱内，静置1 d，使血细胞自行沉淀。（或用2 000 r/min的转速，离心4 min）获得5~10mL鸡血悬液。

2.向鸡血细胞液中加入蒸馏水，并且搅拌5min以上。注意应沿一个方向快速搅拌，但也不能太快太猛，防止打碎DNA。一般5～10 mL的鸡血细胞液加入20 mL蒸馏水搅拌不少于5 min。用2~3层纱布进行过滤，除去一些颗粒较大的杂质。

3.在溶液中加入两倍体积的浓度为2 mol/L的NaCl溶液，充分晃动烧杯，搅拌1 min。注意应沿一个方向搅拌，使DNA充分溶解。

4.缓慢贴壁加入蒸馏水，并轻轻地沿一个方向不停地均匀搅拌，以利于DNA分子的附着和缠绕。同时应注意控制加水量，使NaCl溶液的终浓度为0.1～0.2 mol/L。加水过程一般分三次进行，当总加水量为300 mL左右时，DNA已基本析出。

5.用多层（3~4层）纱布对DNA稀释液进行过滤，滤去蛋白质，收集DNA的黏稠物。如果采用离心法，效果更好。用4 000 r/min转速的离心机，离心15 min，除去上清液(含有蛋白质)，留下的沉淀物中含有DNA。此时注意观察DNA黏稠物的颜色。

6.将DNA黏稠物再溶解，继续用2 mol/L的NaCl溶液20 mL溶解DNA黏稠物，仍旧沿一个方向不停搅拌3 min，使DNA充分溶解，以免损失。用2～3层纱布进行过滤（或离心），滤去杂质，收集含有DNA的滤液。向滤液中贴壁缓慢加入50 mL预冷（5℃24h）的体积分数为95％的乙醇，并用玻璃棒朝一个方向缓慢、均匀地搅拌，溶液中会出现DNA丝状物。

7.两支试管各加入0.015mol/L的NaCl溶液5mL，丝状物放入其中一支试管中，搅拌溶解，两支试管分别加4mL二苯胺试剂，混匀后沸水浴5min，冷却后观察。