尿路感染的诊断不能单纯依靠临床症状和体征，而要依靠实验室检查，诊断还应明确致病菌、感染部位、肾功能状态等，凡是有真性细菌尿者才能诊断为尿路感染。真性细菌尿是指：①膀胱穿刺尿培养，有细菌生长，或菌落数＞10²/mL。②导尿细菌定量培养≥10⁵/mL；③清洁中段尿定量培养≥10⁵/mL，一次准确性为80%，连续两次培养得到同一菌株，菌落数≥10⁵/mL，准确性达95%；如中段尿培养菌落数在10⁴～10⁵/m L之间列为可疑，应重复培养；如为球菌，中段尿培养菌落数≥200/mL即有诊断意义。

钱桐荪教授将诊断依据归纳如下：

(1)症状性尿路感染：临床上有尿频、尿急及尿痛等尿路刺激症状，同时有下列一项指标者诊断可以成立：①清洁中段尿培养菌落数≥10⁵/mL；②清洁中段尿镜检白细胞数＞5/HP，且涂片找到细菌者；③清洁中段尿TTC试验、亚硝酸盐试验或鲎试验阳性，尿白细胞＞5/HP。

(2)无症状性菌尿：临床上无尿路刺激症状，符合下列之一者才能确诊：①连续两次清洁中段尿培养，两次菌落数≥10⁵/mL，且为同一菌株；②一次清洁中段尿培养菌落数≥10⁵/mL，尿白细胞＞5/HP；③耻骨上膀胱穿刺尿培养有致病菌生长或菌落数＞100/mL