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吉姆萨/姬姆萨染色液(Giemsastain,1:9)

(2022-03-22 20:32:02)
标签:

吉姆萨/姬姆萨染色液

简介:

吉姆萨染液由天青 2 与伊红混合而成。染色原理和结果与瑞氏染色法基本相同,姬姆萨染色液对胞浆着色力较强,能较好的显示胞浆的嗜碱性程度,特别是对血液和骨髓细胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜碱性颗粒,着色清晰,但是对胞核着色偏深,核结构显色不佳,常与故姬姆萨染液常与瑞氏染液联合使用。

嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结果,染粉红色,称为嗜酸性物质;细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性,与碱性染料美蓝或天青结合,染紫蓝色,称为嗜碱性物质;中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,染淡紫色,称为中性物质。

BIOISCO Giemsa stain 以进口的吉姆萨/姬姆萨色素为主要原料,通过研磨配制而成,能呈现出清晰的细胞染色效果。经常用于组织切片、血液和细胞涂片、细菌、染色体 显带、原生动物寄生虫等染色。

Giemsa stain(1:9)的特点在于,由 Giemsa stain 储存液(10×)和磷酸盐缓冲液组成,1:9 混合成工作液后使用;亦可以分开使用,即先用 Giemsa stain 染色液染色,再经磷酸盐缓冲液处理,亦可以得到满意的染色效果。

 该产品仅适用于科研实验,不可做他用。

组成:

产品名称

SM013-100ml

SM013-500ml

Storage

试剂(A): Giemsa stain 储存液(10×)

10ml

50ml

RT 避光

试剂(B): 磷酸盐缓冲液

100ml

500ml

RT

说明书

一份

 

保存条件:

室温避光保存,一年有效。

 

自备材料:

1、 载玻片

2、 蒸馏水或去离子水

3、 **

4、 染色架

5、 显微镜

6 0.10.5%的乙酸

 

操作步骤(仅供参考):

()一步法涂片染色

1 Giemsa stain 工作液的配制: 按试剂(A):试剂(B)=1:9混合,即取1份的Giemsa stain储存液(10×)加入到9份的磷酸盐缓冲液中充分混匀,即为Giemsa stain工作液。配制后Giemsastain的工作液为即用型试剂,不易保存,即用即配。

2、 常规方法制备血液涂片或骨髓涂片,待涂片自然干燥后,用**固定13 min

3、 将血液涂片或骨髓涂片放置染色架上,滴加Giemsa stain工作液覆盖涂片,室温滴染1530 min

4、 用自来水或蒸馏水缓慢从玻片一端冲洗。

5、 干燥、镜检。

染色结果:

嗜酸性颗粒

粉红色

嗜碱性颗粒

紫蓝色

中性颗粒

淡紫色

 

()两步法涂片染色

1 Giemsa stain工作液的配制:按试剂(A):蒸馏水或去离子水=1:4配制Giemsa stain工作液,即取1份的Giemsa stain储存液(10×)加入到4份的蒸馏水或去离子水中充分混匀,即为Giemsa stain工作液。配制后Giemsa stain的工作液为即用型试剂,不易保存,即用即配。

2、 常规方法制备血液涂片或骨髓涂片,待涂片自然干燥后,用**固定13 min

3、 将血液涂片或骨髓涂片放置染色架上,滴加Giemsa stain工作液覆盖涂片,室温滴染1015 min

4、 加入等量磷酸盐缓冲液,轻轻晃动载玻片,室温静置510 min

5、 用自来水或蒸馏水缓慢从玻片一端冲洗。

6 干燥、镜检。

染色结果:

嗜酸性颗粒

粉红色

嗜碱性颗粒

紫蓝色

中性颗粒

淡紫色

 

(三)组织切片染色

1 Giemsa 工作液的配制:按试剂(A): 试剂(B) =1:9 配制Giemsa stain工作液,即取1份的Giemsa stain 储存液(10×)加入到9份的磷酸盐缓冲液中,充分混匀,即为Giemsa stain工作液。配制后的Giemsa stain 工作液为即用型试剂,不易保存,即用即配。

2、 新鲜组织立即置于Regaud固定液固定2天,期间应更换1次固定液。

3 3%的****固定1天。

4、 流水冲洗16个小时或过夜。

5、 按照常规脱水、包埋。

6、 切片,厚度约为5 um

7、 常规脱蜡至水。

8、 蒸馏水清洗2次,每次约1 min

9、 置于含有Giemsa stain工作液的染缸内,浸染1824 h

10、 蒸馏水稍微清洗。

11 0.10.5%的乙酸洗12 min

12、 自来水稍微冲洗。

13、 用****迅速脱水3次,每次510 s

14、 二**透明。

15、 中性树脂封固。

 

染色结果:

 

细胞核

蓝色至紫色

细胞质

淡蓝色

嗜铬细胞胞质

黄绿色

结缔组织

淡红色

 

注意事项:

1、 血液涂片或骨髓涂片应厚薄均匀,以免影响染色结果。

2、 涂片染色中Giemsa染色后,请勿先去除染液或直接对涂片用力冲洗。

3、 如果染色过深或过浅,应调整染色时间或工作液的浓度。

4 Giemsa涂片染色和组织切片染色中,pH值对染色有一定影响,载玻片应清洁、无酸碱污染以免影响染色结果。

5、 染色液在稀释后液面应有金属光泽,表示染液有染色作用,否则染色液可能失效。

6 Giemsa组织切片染色中,染色后需用大量0.10.5%的乙酸急速冲洗,避免浮面沉淀物污染切片后难以洗脱。

7 0.10.5%的冰乙酸分化,常用于Giemsa组织切片染色,如有必要亦可用于细胞涂片。

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