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PCR扩增实验材料、试剂和步骤
(2007-05-21 13:33:01)
标签：
实验生物pcr扩增 |
分类： 点滴(日志，工作) |
材料：
1、DNA模板
2、4种dNTP
3、引物1、引物2
4、Taq酶
5、琼脂糖
6、DNA相对分子质量标准物
7、吸头、50ul PCR管
试剂：
10×PCR缓冲液(含Mg2＋）
4×dNTP (每种1mmol)
Tag酶1U/ul
DNA模板
引物1: 5`-
GGGGAATTCATGGTGAGCAAGGGC-3`
引物2:
5`-GACCTGCAGGCATGCAAGCTTGGC-3`
引物溶液浓度：10pmol/ul
步骤：
1、在0.5ml
RCR管内配置20ul反应体系：
2、PCR反应程序：
(1) 95℃变性5min
(2)
94℃变性1min
(3) 52 ℃退火1min
(4) 72 ℃延伸1min
(5) 重复(2)-(4)30次
(6）72
℃延伸1min。
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