以菜花为实验材料进行DNA的粗提取及鉴定

作者： 姚博 (高中生物  甘肃平凉生物一班 )    评论数/浏览数： 2 / 255    发表日期： 2010-08-05 15:28:19

一、课题目标

     本课题通过尝试对植物组织中的DNA进行粗提取，了解DNA的物理化学性质，理解DNA粗提取以及DNA鉴定的原理。

二、教学目标

  知识目标     1.DNA的物理化学性质，尤其是DNA的溶解性；

               2.二苯胺法鉴定DNA的方法。

  能力目标     1.理解相关溶液的作用机理，培养学生的分析能力。

               2.通过DNA的粗提取，培养学生的动手能力。

  情感目标     1.通过小组成员相互配合实验，培养学生的合作精神。

               2.通过实验结果，使学生树立生命的物质性。

三、课题重点与难点

     重点：DNA的粗提取和鉴定方法。

     难点：DNA的粗提取。

四、课题背景分析

     生物体的性状之所以能够遗传给后代，是由于生物体内具有DNA或RNA这些遗传物质。通过必修2《遗传与进化》的学习，学生已经学习了证明DNA是主要的遗传物质的实验证据。那么DNA究竟是什么样的呢？本课题通过实验操作，使学生对DNA有一定的感性认识。

五、实验过程

   （一）课前准备  将新鲜菜花和体积分数为95％的乙醇溶液放入冰箱冷冻室24 h  准备各种试剂和实验用具

                        全班学生分组，每组4-5人为宜.

   （二）DNA的粗提取

     1.取材    称取 30 g菜花，去梗取花，切碎。

     2.研磨    将碎菜花放入研钵中，倒入10 mL研磨液(实验室准备)，充分研磨10 min。

     3.过滤    在漏斗中垫上尼龙纱布，将菜花研磨液过滤到烧杯中。在4 ℃冰箱中放置几分钟后，再取上清液。

     4.沉淀    将一倍体积的上清液倒入两倍体积的体积分数为95％的预冷乙醇溶液中，并用玻璃棒缓缓、轻轻地搅拌溶液(玻璃棒不要直插到烧杯底部)，沉淀3～5 min后，可见白色的DNA絮状物出现。用玻璃棒缓缓旋转，将絮状物缠绕在玻璃棒上。

   （三）DNA的鉴定

     取2支20mL的试管，分别编为1号、2号，各加入物质的量的浓度为0.015mol·L－1的氯化钠溶液3mL，将丝状物用玻璃棒挑起溶于2号试管中（用玻璃棒搅拌，使其充分溶解），然后向2支试管中各加入3mL二苯胺试剂，混合均匀后，沸水浴5min～10min，冷却后2号试管溶液变蓝。

六、课题成果评价

    （一）是否提取出了DNA

     观察你提取的DNA颜色，如果不是白色丝状物，说明DNA中的杂质较多；二苯胺鉴定出现蓝色说明实验基本成功，如果不呈现蓝色，可能所提取的DNA含量低，或是实验操作中出现错误，需要重新制备。

    （二）分析DNA中的杂质

   本实验提取的DNA粗制品有可能仍然含有核蛋白、多糖等杂质。