样品要求

一、 一般通则

1、确定样品N端未被封闭, 否则只要测定后需收开机费.

2、样品如被修饰，请详细告知修饰方式（如CYS的PE修饰，或者CM的修饰）

3、若为已知序列样品，请告知预期序列信息

4、如果样品有特殊理化性质（如特殊酶活性，特殊结构：如含糖单元结构等），请详细说明。

5、请务必告知样品分子量大致范围,如果不能准确确定其分子量,本公司可以帮助测定.

6、建议客户提供溶液样品或含样品的PVDF膜，微量样品尽量不要以冻干粉形式提供，以避免样品损失，特殊情况请致电深圳市翰宇生物工程有限公司咨询。

二、  溶液样品

1、 样品纯度应达到95%以上（HPLC）, 标明准确纯度, N-端必须是均一的高纯样品,并纯度越高，实验结果越理想.纯度可以用采用HPLC,SDS-PAGE或质谱或CE鉴定,建议用2种方法鉴定。

2、 样品量不低于50Pmol ,若浓度为5pmol/μl, 体积不少于10μl, 大于10pmol/μl 越好，并标明准确浓度。例如:分子量20000的蛋白,50Pmol约为1微克.

3、 标明样品缓冲液的成份，保证其样品缓冲液中不含蛋白酶,样品中尽量不含不挥发性的无机盐，浓度在５０Mmol/L内，不含变性剂（SDS）等杂质。

4. 样品测试前不能放置太久，在－20℃以下冷冻保存

三、  PVDF膜样品

1、为防止部分蛋白质可能发生的在电泳过程中被胶内杂质封闭N末端。请考虑做预电泳。即用低电流跑空胶2～2.5小时后再上样进行电泳分离。

2、 电转移缓冲液建议使用CAPS缓冲液，尽量不要使用Tris—甘氨酸缓冲液

3、电泳过程中，应尽量避免条带拖尾现象。用于测序的PVDF膜上条带应狭窄清晰。

4、尽量使用厚胶转膜，保证转膜后单位面积上样品量相对多些。若转膜后目的条带不够清晰，请累积三条以上的目的条带用于测序。

5、样品转膜后，请使用Coomassie R-250染色，避免使用Coomassie G-250。

6、含样品的PVDF膜带用滤纸吸干或者自然凉干后请保存在密闭塑料袋中，冰箱内可以放置3个月左右。