感受肽细胞制备：试剂制备：制备感受肽应提前预定离心机，并将温4℃ YPD培养基：山梨醇1mol/L：离心管50ml 大枪头5ml 无菌水 1 挑取酵母受体菌的单菌落接种于10mlYPD培养基中，30℃摇床过夜。 2 以1 %接种量转接100mlYPD液体培养基，30℃摇床过夜至OD=1.3-1.5。 3 4℃离心5000rpm,5min,弃上清。 4 用100ml冰预冷无均水将菌体重悬。 5 4℃离心5000rpm,10min,弃上清。 6 用50ml冰预冷无均水将菌体重悬。 7 4℃离心5000rpm,10min,弃上清。 8 再用20ml 1 mol/L的山梨醇洗涤1次 9 溶于200ul 1mol/L的冰预冷的山梨醇，以备转化 制备感受肽细胞需灭菌的设备大离心管：小离心管：50ml 大枪头5ml LB培养基： 10%甘油 1 挑单个大肠接入LB液体培养基，培养过夜37℃摇床，并做抗性对照。 2以1：100比例接菌，进行大摇（2ml接入200ml 培养基中37℃摇床） 3OD达到0.5-0.7时，冰上放置20min。4℃离心，4000g，15min.弃上清，不溜残余 4加入等体积的10%甘油轻轻重悬。4℃离心，4000g，15min.弃上清，不溜残余 5加入1/2体积的10%甘油轻轻重悬。4℃离心，4000g，15min.弃上清，不溜残余 6加入1/4体积的10%甘油轻轻重悬。4℃离心，4000g，15min.弃上清，不溜残余 7加入适量灭菌10%甘油，一般500ml菌液加入2ml甘油，重悬， 8分装，每管40ul，先冻与液氮，然后放入-80℃保存