昨天对提取的质粒做了个鉴定，由于第一次用那台分光光度计（国产，7500），结果极其离谱，A260/A280居然超过了2.3，纯的RNA的A260/A280才2.0。所以今天重新测定。各方面进行改进，每一步也都小心翼翼。结果满意。  

质粒浓度C=50×A×n=50×0.290×200ug/ml=2.9mg/ml

           50:在260nm下1个OD值表示50ug/ml的双链DNA

            A：吸光度值

            n：稀释倍数

质粒总含量M=C×V=2.9×0.50=1.45mg

            C：质粒浓度

            V：质粒溶液总体积，共10管，每管50ul.总体积为0.5ml

质粒纯度：A260/A280=0.290/0.160=1.8125。表明质粒纯度比较高。

一些总结：

所提质粒为预期的质粒，质粒浓度和纯度都比较高。可以进行下一步的免疫试验。

在用分光光度计时需要特别注意如下事项，否则会严重影响实验结果：

1.质粒从冰箱取出后要等其完全融化成液体，再用枪头反复吹打混匀后吸取少量进行稀释，稀释后的溶液也要用枪头反复吹打混匀。

2.分光光度计使用前预热20分钟，如天气较冷，要适当延长预热时间。

3.在测定吸光度前确保所用的比色皿干净和干燥。一个盛装对比液，一个盛装样品。

4.在测定时，用对比杯的一面进行调零，再把盛样品液的比色皿放入，测定OD值，通常样品液的比色皿的顺反两面测定的结果会不同，所以要测定两次，顺反各一次。同理，在用对比杯调零时也要用顺反两面调零。故每个样品要测定4次，再取其平均值，可以最大限度减少由比色皿带来的误差。

5.在放比色皿时动作要轻，尽量不碰固定架，比色皿要紧靠左边的透光空。每次都如此，这样可以确保每次的比色皿的相对位置都在同一点，可减少误差。同时，在放好比色皿后，关闭盖子时动作要轻，以防止震动带来测量误差。