加载中…分子生物学常用试剂配制方法
(2010-04-21 20:31:18)
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分类： 须一技之长，专业 |
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分子生物学常用试剂配制方法 |
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氨苄青霉素
﹡组分浓度 ﹡配制量 ﹡配制方法 1．称取5g Ampicillin置于50ml塑料离心管中。 2．加入40ml灭菌水，充分混合溶解之后定容至50ml。 3．0.22μm滤膜过滤除菌，小份分装（1ml一管）后，置于－20℃保存。 |
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卡那霉素
﹡组分浓度 ﹡配制量 ﹡配制方法 1．称取2.5g 卡那霉素置于50ml塑料离心管中。 2．加入40ml灭菌水，充分混合溶解之后定容至50ml。 3．0.22μm滤膜过滤除菌，小份分装（1ml一管）后，置于－20℃保存。 |
RNase A
﹡组分浓度 ﹡配制量
﹡配制方法 2．加入40ml灭菌水，充分混合溶解之后定容至50ml。 3．100℃煮沸15min,缓慢冷却至室温，小份分装（1ml一管）后，置于－20℃保存。 |
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IPTG
﹡组分浓度 ﹡配制量
﹡配制方法 2．加入40ml灭菌水，充分混合溶解之后定容至50ml。 3．用0.22μm滤膜过滤除菌，小份分装（1ml一管）后，置于－20℃保存。 |
X-Gal
﹡组分浓度 ﹡配制量
﹡配制方法 2．加入40mlDMF（二甲基甲酰胺），充分混合溶解之后定容至50ml。 3．小份分装（1ml一管）后，置于－20℃保存 |
DTT
﹡组分浓度 ﹡配制量
﹡配制方法 2．加入8ml的10mM NaAc（pH5.2），充分混合溶解之后定容至10ml。 3．用0.22μm滤膜过滤除菌，小份分装（1ml一管）后，置于－20℃保存。 |
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EDTA溶液
﹡组分浓度 ﹡配制量 ﹡配制方法 2． 加入800ml的去离子水，置于磁力搅拌器上充分搅拌。 3． 用NaOH调节调节pH值至8.0（约20gNaOH），当pH接近8.0时， EDTA方可完全溶解，加入去离子水定容至1L。 4．小份分装后，高温高压灭菌，室温保存 |
四.常用抗生素
氨苄青霉素（ampicillin）（100mg/ml）
溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
羧苄青霉素（carbenicillin）（50mg/ml）
溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
甲氧西林（methicillin）（100mg/ml）
溶解1g甲氧西林钠于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以37.5ug/ml终浓度与100ug/ml氨苄青霉素一起添加于生长培养基。
卡那霉素（kanamycin）（10mg/ml）
溶解100mg卡那霉素于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
氯霉素（chloramphenicol）（25mg/ml）
溶解250mg氯霉素足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以12.5ug/ml～25ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
链霉素（streptomycin）（50mg/ml）
溶解0.5g链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
萘啶酮酸（nalidixic acid）（5mg/ml）
溶解50mg萘啶酮酸钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以15ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
四环素（tetracyyline）（10mg/ml）
溶解100mg四环素盐酸盐于足量的水中，或者将无碱的四环素溶于无水乙醇，定容至10ml。分装成小份用铝箔包裹装液管以免溶液见光，于-20℃贮存。常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
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