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加标标准曲线 and 回收率

(2013-06-05 01:38:58)
分类: 工作行业

方法回收率是整个实验流程的回收率,应该在第一步时加入标准样,或者在实验同时加做可控样品,测得回收率即为方法回收率。

加标回收率:在测定样品的同时, 于同一样品的子样中加入一定量的标准物质进行测定, 将其测定结果扣除样品的测定值, 以计算回收率.加标回收率用来评价分析方法和测量系统准确度。

http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20080327/1203754/

 

 

方法学验证

 

 

 

1.标准曲线是标样梯度稀释之后上机检测,这可以用来确定物质的相关信息和计算方法的回收率;
2.添加高中低三个浓度到空白样品中经过整个前处理那是用于计算的方法的回收率,精密度和准确度;
3.添加梯度量到空白样品中经过整个前处理再上机形成的曲线叫工作曲线,这可以直接用来检测样品,避开了回收率的问题;

 

我们实验室一般做的思路是这样的。

1.标准曲线(一系列未经过前处理的标样)要做,得到目标物的线性方程。

   再加已知浓度的标样进行前处理,仪器可以得到一个处理后的响应值A1,再将已知浓度带入标准曲线的线性方程,得到响应值A2,A1/A2是你这个方法的绝对回收率,一般痕量或者前处理复杂的方法在50%以上就可以了。2.经过处理的标样,一系列浓度绘制曲线,可以得到工作曲线和工作曲线线性方程。

   再通过选取线性范围内低中高三个点来做加标,这是验证方法的准确度,可以得到相对回收率。这个一般要求在90%-110%之间。

 

http://emuch.net/html/201303/5550400.html

 

http://wenku.baidu.com/view/e8986446b307e87101f696b8.html

 

绝对回收率(又称提取回收率)考察测定结果与“真值”的接近程度,从生物样本基质中回收得到目标物质的响应值除以纯标准品产生的响应值即为分析物的绝对回收率。应选用高、中、低三种浓度分别进行考察,绝对回收率一般要求在50%~80%。 

相对回收率(又称方法回收率),从生物样本基质中回收得到目标物质的响应值除以加入到生物基质中已知量的标准品产生的响应值即为分析物的相对回收率。该评价指标已扣除了目标药物在样品的前处理过程损失而造成的系统误差。高、中浓度点测得的相对回收率应在85~115%,低浓度(定量限)应在80~120%。 

回收率包括绝对回收率和相对回收率。绝对回收率考察的是经过样品处理后能用于分析的药物的比例。因为不论是生物基质还是制剂辅料中的药物,经过样品处理都有一定的损失。做为一个分析方法,绝对回收率一般要求大于50%才行。它是在空白基质中定量加入药物,经处理后与标准品的比值。标准品为流动相直接稀释而来,而不是同样品一样处理。若一样,只是不加基质来处理,可能会有很多影响因素被此屏蔽掉。如全部转移有机相时只转移了98%等。也就因此失去了绝对回收率的考察初衷。
  
相对回收率严格来说有两种。一种是回收试验法,一种是加样回收试验法。前者是在空白基质中加入药品,标准曲线也是同此,这种测定用得较多,但有标准曲线重复测定的嫌疑。第二种是在已知浓度样品中加入药物,来和标准曲线比,标准曲线也是在基质中加药物。相对回收率主要考察准确度。

http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20071022/1029962/

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