梵蒂冈博物馆(The Vatican Museum)，拥有12个陈列馆和5条艺术长廊，汇集了希腊、罗马的古代遗物以及文艺复兴时期的艺术精华，大都是无价之宝。

卡拉瓦乔的几幅绘画，包括基督下葬 (1602 - 1603)；

列奥纳多·达芬奇的肖像画圣哲罗姆；

安吉利柯、乔托、 拉斐尔、尼古拉·普桑和提香的绘画作品；

原放置于圣乔凡尼大教堂的红色大理石教宗宝座；

古罗马雕塑、墓碑和碑铭，包括Lucius Cornelius Scipio Barbatus的墓志铭；

拉斐尔的大量作品，包括雅典学院；

西斯廷礼拜堂：是因为艺术大师米开基罗在此创作了绘画珍品《创世纪》和《末日的审判》。顶棚的《创世纪》面积300平方米，由9幅中心画面组成，画出上帝创造世界的过程。《末日的审判》则位于正面壁上，充满绝望阴沉的气息，该画描绘的是世界末日来临时，基督把万民召集在自己面前，分出善恶的情景。

米开朗基罗创作时，工作极为艰苦，谢绝一切助手。由于长期仰面作画，他颈项僵直，导致无法正常直立身体行走，看书读信都要放置在头顶仰视。歌德曾评论说，“没有到过西斯廷礼拜堂的人，无法了解一个人所能做的事。

地图廊：意大利各地全图，教皇格雷戈里十三世（1502年1月7日－1585年4月10日）委派佩鲁贾的Ignazio Danti绘于墙上。该画廊位于Belvedere庭院的西侧，长120米。Ignazio Danti 花了三年 (1580–1583) 完成了40幅画作。画廊天花上的装饰是一群风格主义画家（如Cesare Nebbia和Girolamo Muziano）的作品。