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引物溶解、保存问题

(2008-08-22 11:18:02)
标签:

杂谈

干粉引物溶解稀释方法:

     收到引物后,在开启离心管盖前在3000-4000转/分钟的转速下离心1分钟,以防开盖时引物干粉散失。引物保存在高浓度的状况下比较稳定。如果对实验的重复性要求较高,合成的OD数较大,建议分装,避免反复冻融。引物一般配制成10-100pmol/ul(umol/l)。

三博远志的引物在出厂时都标有1OD 相当于多少umol 的计算结果,进行稀释时的引物加水量可以按以下公式计算:

    稀释成100pmol/ul   1OD 需加水量(ul)=1OD相当于umol 数×10000

     例如,您拿到的引物DNA合成报告单上标有1OD≈0.0035umol ,包装量是1OD/管,如果您希望将引物浓度定为100umol/L,那么只需用35ul无核酸酶的双蒸水将1OD的引物干粉溶解即可。

    液体引物再稀释可用下列公式

    稀释引物要达到的浓度(pmol/ul)=母液浓度(pmol/ul)×汲取母液的体积(ul)÷(汲取母液的体积(ul)+加水量(ul)


 

引物一般来的时候是干粉。这种状态能保存最长的时间。
如果你要用的话要先离心,我离了10分钟(12000转)。然后用它上面写的nmol*1000/你的终浓度=你要加的水量
溶解液有TE和dd水,我用的是dd水因为我没有TE。TE其实就是tris盐酸和EDTA的混合液。理论上用TE保存好,不容易降解。
一般配的时候要先配成储存液(浓度是100umol),在配成使用液(浓度是20umol)。这样的好处是引物不容易降解。
引物忌讳反复冻溶,大家要注意。如果你都配成了使用液就应该分装。
使用液放在4度(2/3个月没问题的),储存液放在-20度。
与大家共享,有不准确的地方请大家指正。谢谢!

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