黑化大家鼠肺成纤维细胞的传代与冻存及应用研究！

黑化大家鼠肺成纤维细胞是一种常用的细胞系，以下是关于它的详细介绍：

一、基本信息

细胞名称为 (NRm) 黑化大鼠肺成纤维细胞，也可称为 NRL2 细胞。该细胞系来源于一雄性黑化型挪威大鼠的肺组织，1985 年由中国科学院细胞库建立。

二、细胞特性

形态：呈成纤维细胞样，通常为突起的纺锤形或星形的扁平状结构。

生长特性：贴壁生长，需要附着在培养容器的表面才能正常生长和增殖。

疾病特征：属于正常细胞，无特定疾病特征。

支原体检测：通常为阴性，表明细胞未受到支原体污染，可用于正常的细胞实验研究。

三、培养条件

培养基：常用 M-199 培养基，添加 Earle's 平衡盐溶液（EBSS）和 15% 的胎牛血清（NBS）。也可使用 90% DMEM (H)+10% FBS 的培养基组合。

生长环境：需在 37、95% 空气和 5% 二氧化碳的气相环境中培养。

四、传代与冻存

传代方法：一般采用 1:2 至 1:6 的比例进行传代，每周传代 2 次。当细胞长满瓶底面积的 70%-80% 时，即可进行传代操作。

冻存条件：冻存液通常为 90% 完全培养基 + 10% DMSO，可将细胞置于液氮中存储。

五、黑化大家鼠肺成纤维细胞的应用

黑化大家鼠肺成纤维细胞作为一种来源明确、特性稳定的正常大鼠肺成纤维细胞系，在生命科学多个研究领域具有广泛应用，具体包括以下方面：

1、基础医学与细胞生物学研究

细胞生理机制研究：可用于探索成纤维细胞的基本生命活动规律，如细胞增殖、分化、凋亡的调控机制，以及细胞周期进程中相关基因和蛋白的表达变化，为理解成纤维细胞的生理功能提供基础数据。

细胞信号通路研究：作为体外细胞模型，用于分析各类信号分子对肺成纤维细胞的调控作用，以及相关信号通路的激活与传导机制，明确信号网络在细胞功能调节中的作用。

2、呼吸系统相关疾病研究

肺纤维化研究：肺成纤维细胞的异常增殖和胶原蛋白过度分泌是肺纤维化的核心病理过程。该细胞系可模拟肺纤维化的病理状态，用于研究疾病发生发展的分子机制，筛选抑制成纤维细胞活化、减少胶原沉积的潜在药物，同时评估药物的作用效果和安全性。

肺部炎症与损伤修复研究：可用于探索肺部受到感染、化学物质刺激等损伤后的修复机制，分析炎症因子对肺成纤维细胞的影响，以及成纤维细胞在肺组织修复过程中的作用，为肺部损伤相关疾病的治疗提供理论依据。

3、药物研发与毒理学评价

药物筛选与活性评估：针对呼吸系统疾病、纤维化相关疾病的候选药物，可在该细胞系中进行体外活性检测，观察药物对细胞增殖、分泌功能的影响，初步筛选出具有潜在治疗效果的药物分子。

药物及毒物毒性评价：用于评估各类化学药物、环境污染物对肺组织细胞的毒性作用，检测细胞存活率、氧化应激水平、凋亡率等指标，明确药物或毒物的安全剂量范围，为临床用药安全和环境保护提供数据支持。

4、基因工程与生物技术研究

基因功能验证：通过转染技术将目的基因导入该细胞系，或利用 RNA 干扰等技术沉默特定基因，观察细胞表型的变化，从而验证基因在肺成纤维细胞功能调节、疾病发生中的作用，为基因治疗研究提供基础。

载体构建与表达验证：作为基因表达的体外宿主细胞，用于验证重组载体的构建效果，检测目的基因的表达水平，为后续的基因工程产品研发提供技术支撑。

5、其他相关研究

生物材料相容性研究：在肺部组织工程领域，可用于评估新型生物材料与肺成纤维细胞的相容性，观察细胞在材料表面的黏附、生长情况，为生物材料的优化设计提供依据。

感染性疾病相关研究：部分研究中可用于模拟肺部病原体对肺间质细胞的感染过程，分析细胞的免疫应答机制，为感染性肺病的防治研究提供参考。

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