干燥培养基的成分与用途及配制方法与质量控制!
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分类: 培养基 |
一、干燥培养基的定义
干燥培养基(Dehydrated Culture Media)是通过将培养基成分(如碳源、氮源、无机盐、生长因子等)脱水制成的粉末或颗粒状产品。其优点是便于运输、储存,且保质期长(通常1-3年),使用前需按比例复水配制。
二、主要成分
1、基础营养物:蛋白胨、牛肉膏、酵母提取物等。
2、选择性成分:抑制剂(如胆盐、抗生素)用于抑制非目标微生物。
3、指示剂:酚红、中性红等用于显色反应(如鉴别大肠杆菌)。
4、凝固剂:琼脂(1.5-2.0%用于固体培养基)。
三、用途
微生物培养、分离、鉴定(如细菌、真菌)。
药敏试验、水质检测、食品微生物检验等。
科研、医疗、工业及环境监测领域。
四、配制步骤
1、称量
按说明书比例称取干燥培养基(如23.5g/L营养琼脂)。
使用精密天平,避免误差。
2、溶解
将粉末加入蒸馏水/去离子水,搅拌加热至沸腾(琼脂需完全溶解)。
3、pH调整
冷却至25后测量pH,用NaOH/HCl调节至规定值(如pH 7.2±0.2)。
4、分装与灭菌
分装至培养皿或试管,121高压灭菌15-20分钟(含糖培养基需115灭菌)。
5、冷却与保存
灭菌后倾斜放置(斜面培养基)或室温凝固,2-8短期保存。
五、注意事项
1、灭菌规范:避免过热导致成分分解(如糖类焦化)。
2、无菌操作:配制环境需洁净,避免污染。
3、储存条件:未开封干燥培养基应密封避光,存放于阴凉干燥处;已复水的培养基需冷藏并尽快使用。
4、安全防护:配制时穿戴手套/口罩,避免吸入粉末。
六、质量控制
1、物理检查:复水后应无沉淀、浑浊或异常颜色。
2、无菌试验:随机抽样培养基置于37培养24小时,确认无微生物生长。
3、性能验证:使用标准菌株(如大肠杆菌ATCC 25922)测试生长情况与预期一致。
七、常见问题处理
1、结块:干燥培养基受潮结块时不可使用。
2、沉淀:灭菌后轻微沉淀属正常,若大量沉淀需重新配制。
3、颜色异常:如变深或变浅,可能因过度加热或过期导致。
八、废弃处理
使用后的培养基需高压灭菌后再丢弃,避免生物污染。
通过规范操作和严格质量控制,干燥培养基可为微生物实验提供可靠支持。具体细节请以产品说明书为准。
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