小鼠骨髓纤维原细胞的传代与冻存及主要用途与应用！

小鼠骨髓纤维原细胞是从小鼠骨髓组织中分离得到的一种成纤维细胞样细胞，在生物学和医学研究中具有重要作用。以下是关于它的详细介绍：

一、细胞来源

常见的小鼠骨髓纤维原细胞系 M2-10B4，是由 CJ Eaves 从 (C57BL/6J×C3H/HeJ) F1 小鼠的骨髓基质中分离建立的。

二、形态与生长特性

细胞形态呈成纤维细胞样，具有贴壁生长的特性，通常在培养瓶中会贴附于瓶壁表面生长。

三、培养条件

一般使用 RPMI-1640 培养基，添加 10% 的胎牛血清（FBS）和 1% 的双抗（青霉素 - 链霉素），培养环境为 95% 的空气和 5% 的二氧化碳，温度维持在 37。

四、传代与冻存

当细胞密度达到 80%-90% 时，可进行传代，推荐传代比例为 1:3-1:4，2-3 天传一代。冻存时，使用含 55% 基础培养基、40% FBS 和 5% DMSO 的冻存液，将细胞置于冻存管中，先在 - 20放置 1.5 小时，然后移入 - 80过夜，24 小时后转入液氮中长期保存。

五、细胞特性

M2-10B4 细胞表达层粘连蛋白和胶原蛋白 IV，但不表达胶原蛋白 I，在长期培养体系中能够支持人或鼠的骨髓组织生成。

六、主要用途

小鼠骨髓纤维原细胞主要用于细胞和癌症相关研究，可帮助研究人员了解骨髓微环境对造血干细胞的影响，以及在疾病发生发展过程中骨髓纤维原细胞的作用机制等。

七、小鼠骨髓纤维原细胞在癌症研究中的广泛应用

小鼠骨髓纤维原细胞因其能模拟骨髓微环境的特性，在多种癌症研究中被广泛应用，尤其聚焦于骨髓微环境与癌症发生、发展、转移及治疗响应的关联。以下是其主要应用的研究领域：

1、血液系统恶性肿瘤（白血病、骨髓瘤等）

白血病微环境研究：骨髓是白血病细胞（如急性髓系白血病、慢性粒细胞白血病细胞）的主要“庇护所”。小鼠骨髓纤维原细胞可模拟骨髓基质细胞，研究其如何通过分泌细胞因子、表达黏附分子或改变代谢环境，支持白血病细胞的存活、增殖和耐药性，进而探索靶向微环境的治疗策略。

多发性骨髓瘤研究：骨髓瘤细胞依赖骨髓微环境存活，骨髓纤维原细胞可通过分泌生长因子、促进血管生成或诱导破骨细胞活化，加速骨髓瘤进展。该细胞常用于解析这种“肿瘤 - 基质”互作机制，筛选抑制骨髓瘤生长的药物。

2、实体瘤骨转移研究

多种实体瘤（如乳腺癌、前列腺癌、肺癌）易发生骨转移，而骨髓微环境是肿瘤细胞定植骨组织的关键场所。小鼠骨髓纤维原细胞可用于：

研究肿瘤细胞与骨髓基质的相互作用：例如，乳腺癌细胞如何通过分泌因子诱导骨髓纤维原细胞表型改变，促进骨转移灶形成；

模拟骨转移微环境：通过共培养模型，分析肿瘤细胞在骨髓纤维原细胞支持下的存活、增殖及对骨组织的破坏（如通过调节成骨 / 破骨平衡），为抗骨转移药物研发提供模型。

3、肿瘤干细胞与耐药性研究

骨髓微环境中的纤维原细胞可通过维持肿瘤干细胞的“干性”促进肿瘤复发和耐药。小鼠骨髓纤维原细胞常被用于构建共培养体系，研究其对肿瘤干细胞自我更新能力的影响，以及如何通过靶向基质 - 干细胞互作逆转耐药性。

4、骨髓纤维化相关肿瘤研究

骨髓纤维化是骨髓微环境异常的典型疾病，部分病例可能进展为急性白血病。小鼠骨髓纤维原细胞可用于研究纤维化过程中基质细胞的异常活化（如过度分泌胶原蛋白、细胞外基质重构）如何促进肿瘤发生，以及纤维化与恶性转化的关联机制。

总之，小鼠骨髓纤维原细胞的核心价值在于其作为骨髓微环境的关键组成部分，为解析“肿瘤 - 基质”互作、微环境对肿瘤行为的调控机制提供了可靠的体外模型，助力开发针对微环境的癌症治疗新策略。

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