大鼠肾上腺皮质细胞的分泌功能与培养方法及研究意义!
(2025-10-25 16:07:25)
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知识方法研究意义 |
分类: 细胞 |
大鼠肾上腺皮质细胞是位于大鼠肾上腺皮质部分的细胞,具有重要的生理功能,以下是相关介绍:
一、细胞来源与结构
大鼠肾上腺皮质细胞分离自肾上腺组织,肾上腺左右各一,位于肾的上方。从侧面观察,腺体分肾上腺皮质和肾上腺髓质两部分,周围部分是皮质。肾上腺皮质由 3 层构成,细胞形态多样,在体外培养时呈梭形、多角形或圆形等,贴壁生长。
二、细胞特性
1)组织来源于实验动物的正常肾上腺组织。
2)细胞鉴定:3β-HSD免疫荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式:圆形或多角形细胞,不规则细胞,贴壁培养。
三、分泌功能
肾上腺皮质细胞能分泌多种激素,如醛固酮、皮质醇和少量的雌雄激素。醛固酮可促进小便中尿钾的排出和尿钠的重吸收,对维持正常血压有重要作用;皮质醇在人体处于应激状态时大量分泌,能够动员机体的存储能源,为应对内外事件提供物质准备;肾上腺产生的雄激素对女性而言是雄激素的一个重要来源。
四、培养方法
通常采用胶原酶消化法制备,培养时需用鼠尾胶原 等进行包被,培养基一般含有 FBS、生长添加剂等,培养条件为气相 95% 空气、5% CO,温度 37,每 2-3 天换液一次,可传 1-3 代左右,2 代以内状态最佳。
五、细胞的运输和保存
视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
六、研究意义
体外培养大鼠肾上腺皮质细胞为研究肾上腺皮质功能减退等疾病提供了基础和前提,有助于深入了解肾上腺皮质相关疾病的发病机制、病理生理过程,并为药物研发等提供实验模型。
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