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大豆胰酪蛋白胨肉汤的基本原理和使用方法及注意事项!

(2025-10-21 15:10:59)
标签:

知识

方法

注意事项

分类: 培养基

  大豆胰酪蛋白胨肉汤的基本原理和使用方法及注意事项!

 


一、基本原理

 

大豆胰酪蛋白胨肉汤是一种广泛用于微生物培养的通用型液体培养基,主要用于细菌的增菌培养、无菌检查、环境微生物监测等场景。其配方设计基于微生物生长的营养需求,核心原理如下:

 

1、营养成分提供

 

胰酪蛋白胨(Casein Digest):由酪蛋白经胰酶消化而成,富含氨基酸、多肽等含氮物质,为微生物提供氮源、碳源和生长因子。

 

大豆蛋白胨(Soybean Digest):大豆蛋白经酶解后的产物,补充胰酪蛋白胨中可能缺乏的氨基酸和维生素,拓宽培养基对不同微生物的适用性。

 

氯化钠(NaCl):维持培养基的渗透压,模拟微生物自然生长环境的离子平衡。

 

水:作为溶剂,保证营养物质的溶解和微生物代谢的液体环境。

 

2、适用性

 

由于营养成分全面,SCD 肉汤可支持多种革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌及部分真菌的生长,尤其适用于需氧菌和兼性厌氧菌的增菌,是医药、食品、化妆品等领域无菌检查的常用培养基(符合《中国药典》等标准)。

 

二、使用方法

 

1、培养基制备(以干粉培养基为例)

 

称量与溶解:根据说明书称取适量 SCD 肉汤干粉(如每 1000mL 水加 30g),加入蒸馏 water 或纯化水中,搅拌至完全溶解。

 

分装:将溶解后的培养基分装至锥形瓶、试管或培养瓶中(如需灭菌后使用,注意预留膨胀空间)。

 

灭菌:121高压蒸汽灭菌 15-20 分钟(灭菌条件需严格遵循标准,避免营养成分破坏或灭菌不彻底)。

 

冷却:灭菌后取出,待冷却至 40-50左右备用(如需立即使用,可快速冷却至室温)。

 

2、样品接种与培养

 

接种:取待检测样品(如液体样品、固体样品的浸出液等),按无菌操作要求加入到灭菌后的 SCD 肉汤中(通常样品与培养基比例为 1:10,具体可根据检测标准调整)。

 

培养条件:

 

温度:一般需氧菌培养温度为 30-35;如需检测特定微生物(如嗜冷菌),可调整至 20-25。

 

时间:通常培养 18-24 小时,若结果为阴性,可延长至 48 小时(根据检测目的确定)。

 

环境:需氧培养,无需厌氧条件(若培养厌氧菌,需搭配厌氧装置)。

 

3、结果观察与后续操作

 

观察:培养后观察培养基是否浑浊(提示微生物生长),或有无沉淀、菌膜形成。

 

后续检测:若培养基浑浊,可进一步接种至固体培养基(如营养琼脂)进行分离纯化,或通过生化试验、分子生物学方法鉴定微生物种类。

 

三、注意事项

 

干粉培养基应密封保存在阴凉干燥处,避免吸潮结块。

 

灭菌过程需严格控制温度和时间,过度灭菌可能导致培养基变色、营养流失。

 

操作全程需无菌操作,避免环境中杂菌污染,影响检测结果。

 

若培养基灭菌后出现浑浊、沉淀或颜色异常(正常为淡黄色澄清液体),应废弃,不可使用。

 

通过以上步骤,SCD 肉汤可高效用于微生物的增菌和初步筛查,是微生物检测中基础且重要的培养基之一。

 

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