TGC培养基：广泛应用于临床微生物学和工业微生物检测

 

TGC 培养基（Thioglycollate Medium）是一种用于培养厌氧、微需氧和需氧微生物的通用液体培养基，尤其适用于厌氧菌的分离、培养和活力检测。其核心原理是通过化学物质创造梯度氧环境，满足不同氧需求微生物的生长，广泛应用于临床微生物学和工业微生物检测。

 

一、TGC 培养基的原理

 

TGC 培养基的核心设计围绕 “氧梯度环境” 构建，主要通过以下成分实现：

 

1、硫代乙醇酸钠（Thioglycollate）

 

这是培养基的关键成分，作为还原剂可消耗环境中的氧气，降低培养基的氧化还原电位。其浓度通常为 0.05%~0.2%，能在培养基中形成从表面到底部的氧梯度：

 

培养基表层因接触空气，氧气含量较高，适合需氧菌生长；

 

中层氧气含量较低，适合微需氧菌生长；

 

底层几乎无氧（还原环境），适合厌氧菌生长。

 

2、琼脂（Agar）

 

通常添加 0.05%~0.1% 的低浓度琼脂，其作用是减缓培养基中氧气的扩散速度，稳定氧梯度，避免因震荡导致氧气分布均匀化。

 

3、营养基础成分

 

含胰酪蛋白胨、大豆蛋白胨、葡萄糖等，提供微生物生长所需的碳源、氮源、维生素和矿物质，满足各类微生物的营养需求。

 

4、指示剂（可选）

 

部分配方添加亚甲蓝或刃天青作为氧化还原指示剂：

 

有氧环境中呈蓝色（亚甲蓝）或粉红色（刃天青）；

 

无氧环境中呈无色，可直观判断培养基的还原状态和氧梯度位置。

 

二、TGC 培养基的使用方法

 

1、培养基的制备

 

配方（典型）：胰酪蛋白胨 15g、大豆蛋白胨 5g、葡萄糖 5g、氯化钠 2.5g、硫代乙醇酸钠 0.5g、琼脂 0.75g、水 1000mL，pH 调至 7.2±0.2（25）。

 

制备步骤：

 

按配方称量各成分，溶于蒸馏水中，加热溶解；

 

分装于试管（约 15mL / 管）或锥形瓶中，121高压蒸汽灭菌 15 分钟；

 

灭菌后趁热直立放置，冷却至室温（此时琼脂凝固，形成直立的柱状培养基）；

 

若含指示剂，新鲜培养基应呈无色或淡粉色（若表层氧化呈蓝色 / 粉红色，可在 80水浴中加热 10 分钟还原，冷却后使用）。

 

2、接种方法

 

样本类型：适用于临床标本（如血液、脓液、组织匀浆）、食品样品或环境样品中各类微生物的培养。

 

操作步骤：

 

用无菌接种针或吸管取待检样本，垂直刺入培养基底部（避免过度搅动，防止破坏氧梯度）；

 

若为液体样本，可直接滴加 1~2 滴于培养基表面或深层；

 

接种后轻轻混匀（仅表层轻微晃动），避免氧梯度紊乱。

 

3、培养条件

 

温度：通常 35~37培养，部分微生物（如嗜冷菌）需调整至 20~25。

 

时间：根据目标菌生长速度而定，厌氧菌一般需培养 48~72 小时，需氧菌可在 24~48 小时观察结果。

 

观察指标：

 

需氧菌：多在培养基表层生长，形成浑浊或菌膜；

 

微需氧菌：在培养基中层（氧含量较低区域）生长；

 

厌氧菌：在培养基底层（无氧区域）生长，形成沉淀或浑浊。

 

4、注意事项

 

避免反复开盖：接种和观察时减少试管开盖次数，防止氧气大量进入破坏底层厌氧环境。

 

新鲜度：培养基需现配现用，存放时间不宜超过 1 周（4冷藏），若指示剂显示表层氧化范围过大（超过 1/3），需重新加热还原后使用。

 

无菌操作：严格无菌操作，避免污染，否则可能掩盖目标菌的生长。

 

三、应用场景

 

临床检测：用于血液、伤口分泌物中厌氧菌（如破伤风梭菌、产气荚膜梭菌）和需氧菌的同时培养，辅助诊断感染类型。

 

微生物鉴定：通过细菌在培养基中的生长位置，初步判断其氧需求类型（需氧、厌氧、微需氧）。

 

无菌检查：用于药品、生物制品的厌氧菌无菌性检测，确保无厌氧致病菌污染。

 

TGC 培养基的核心优势在于 “一管多能”，无需单独设置厌氧环境即可同时培养不同氧需求的微生物，操作简便且成本低，是微生物实验室常用的基础培养基之一。

 

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