大鼠甲状旁腺细胞的形态特征与功能调控机制及研究方法！

 

一、解剖学与组织学特征

 

1、位置与数量

 

大鼠仅有1对甲状旁腺（左右各1个），附着于甲状腺表面，呈白色结节状，外包结缔组织被膜。

 

术中辨识：呈梭形，颜色较甲状腺浅红，位于甲状腺上极外侧，边界清晰。

 

2、细胞构成

 

主细胞：占实质细胞多数，分泌甲状旁腺激素（PTH），胞质含丰富粗面内质网、高尔基体及分泌颗粒。

 

嗜酸细胞：大鼠罕见，功能不明。

 

高组织密度：细胞排列紧密，与甲状腺的松散结构形成对比，影响造影剂渗透（如氧化铁纳米颗粒仅染色甲状腺）。

 

二、细胞培养技术及功能维持

 

1、原代培养方法

 

消化分离：胶原酶或胶原酶/胰蛋白酶联合消化获取细胞。

 

培养优化：

 

模拟微重力培养：细胞聚集成团，PTH分泌量和存活率显著高于静置培养（第7天存活率提升，PTH浓度↑）。

 

支架载体：聚羟基乙酸（PGA）支架促进细胞沿纤维伸展，增强细胞连接。

 

功能峰值：培养第5天细胞分泌功能最强，超微结构完整（富含线粒体及分泌颗粒）。

 

2、共培养技术

 

与间充质干细胞（ADMSCs）共培养：

 

比例1:5时PTH分泌最高（较单培养提升2倍），可能与旁分泌因子调控相关。

 

表：共培养比例对PTH分泌的影响

 

比例（甲状旁腺细胞:ADMSCs） PTH分泌水平 显著性

 

2:1   轻度升高  不显著

 

1:2   升高      部分时间显著

 

1:5   显著升高  持续显著

 

三、功能调控机制

 

1、PTH分泌的调节

 

血钙负反馈：血钙↓ → 直接刺激主细胞分泌PTH → 激活破骨细胞、促肾钙重吸收、抑制成骨细胞。

 

药物干预：

 

钙三醇（1,25-(OH)D）：在慢性肾衰（CRF）模型中，皮下注射可抑制甲状旁腺细胞增殖，促进凋亡，降低iPTH。

 

2、PTH的双向细胞效应

 

肾小球系膜细胞（GMC）：

 

低浓度PTH（10¹¹~10 mol/L）短时（6~12h）促进增殖；

 

高浓度或持续作用（48h）则抑制增殖，阻滞细胞于G0/G1期。

 

四、疾病模型中的应用

 

1、慢性肾衰（CRF）模型

 

5/6肾切除诱导：

 

CRF组：甲状旁腺细胞凋亡率↓（0.23% vs 正常1.29%），增殖指数↑（16.93% vs 1.76%），iPTH显著升高。

 

钙三醇治疗：凋亡率恢复至近正常水平（1.32%），抑制异常增殖。

 

2、移植研究

 

裸鼠宿主过渡移植：供体甲状旁腺移植至裸鼠体内100天后，再移植至受体大鼠，可显著延长受体存活时间。

 

细胞移植载体：PGA支架作为细胞移植载体，维持三维结构及分泌功能。

 

五、实验技术进展

 

1、术中成像模型

 

氧化铁纳米颗粒造影：局部注射后甲状腺被染黑，甲状旁腺因高密度保持未染色，实现"负显影"。

 

自发荧光成像：无创但信号较弱，适用实时定位。

 

2、流式细胞术应用

 

用于检测细胞凋亡率、周期分布（如CRF模型中S期细胞比率变化）。

 

六、总结

 

大鼠甲状旁腺细胞研究聚焦于解剖辨识、体外功能维持、钙-PTH轴调控机制及疾病模型构建。其高组织密度特性被用于术中成像，而移植治疗中裸鼠过渡宿主和支架载体技术有望解决供体存活难题。未来需深入探索PTH分泌的分子通路及共培养中ADMSCs的调控机制。

 

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