胆盐葡萄糖肉汤的使用方法与适用场景及注意事项有哪些？

 

胆盐葡萄糖肉汤（Bile Salt Glucose Broth）是一种选择性液体培养基，主要用于肠道致病菌（如沙门氏菌、志贺氏菌等）的增菌培养，同时抑制部分非致病菌的生长。以下是其原理及使用方法的详细说明：

 

一、原理

 

1、选择性抑制

 

胆盐：作为选择性抑制剂，可抑制革兰氏阳性菌（如葡萄球菌、链球菌）及部分非致病性肠道革兰氏阴性菌（如大肠杆菌）的生长，但对沙门氏菌、志贺氏菌等致病菌的抑制较弱，从而实现选择性增菌。

 

2、营养支持

 

葡萄糖：作为主要碳源，支持目标菌（如沙门氏菌）的生长代谢。目标菌分解葡萄糖产酸，导致培养基pH下降。

 

3、酸碱指示剂

 

通常添加溴甲酚紫（pH指示剂），初始颜色为紫色。当目标菌发酵葡萄糖产酸时，培养基变黄；若细菌不发酵葡萄糖，颜色保持紫色或变为深紫色（某些菌分解蛋白质产碱）。

 

二、使用方法

 

1、样本处理

 

临床样本：如粪便、直肠拭子等，可直接接种或经预增菌后接种。

 

食品/环境样本：需均质化后取适量接种。

 

2、接种与培养

 

将样本接种于胆盐葡萄糖肉汤中，混匀。

 

培养条件：

 

温度：35–37（常规培养）或42（用于沙门氏菌选择性增菌）。

 

时间：18–24小时，部分需延长至48小时。

 

环境：需氧或微需氧条件（根据目标菌调整）。

 

3、结果观察

 

颜色变化：

 

变黄：葡萄糖发酵产酸（可能为目标菌，如沙门氏菌）。

 

紫色或深紫色：未发酵葡萄糖（可能为其他菌或非目标菌）。

 

浑浊度：液体浑浊提示细菌生长。

 

4、后续鉴定

 

挑取培养物进行革兰氏染色、生化试验或血清学鉴定，确认目标菌。

 

三、注意事项

 

1、选择性局限：

 

部分大肠杆菌或其他非致病菌可能耐受胆盐，需结合其他生化试验排除。

 

2、假阳性/假阴性：

 

某些非目标菌可能产酸（假阳性），需结合培养特性综合判断。

 

部分沙门氏菌（如伤寒沙门氏菌）发酵葡萄糖产酸但产气少，需延长培养时间。

 

3、质量控制：

 

定期用标准菌株（如鼠伤寒沙门氏菌ATCC 14028）验证培养基性能。

 

4、储存条件：

 

干粉培养基避光干燥保存，配制后液体培养基需冷藏（2–8），1周内使用。

 

四、适用场景

 

临床诊断：肠道感染病原菌（如沙门氏菌、志贺氏菌）的初步筛查。

 

食品检测：食品中沙门氏菌污染的增菌培养。

 

环境监测：水体或表面样本的肠道致病菌检测。

 

通过胆盐葡萄糖肉汤的选择性增菌，可提高目标菌的检出率，为后续分离鉴定提供基础。实际应用中需结合具体实验目的和样本类型优化操作流程。

 

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