培养基的移种方法与操作步骤及常见问题与注意事项！

 

培养基移种是将微生物从一种培养基转移到另一种培养基的关键操作，常用于菌种扩增、纯化或特性研究。以下是详细的移种方法及注意事项：

 

一、基本移种步骤（以斜面→液体培养基为例）

 

1、准备工作

 

无菌环境：在超净工作台或酒精灯火焰附近操作。

 

工具灭菌：接种环/针灼烧至红热，冷却备用。

 

标记：新培养基标记菌种名称、日期、操作者。

 

2、取菌操作

 

灼烧接种环：垂直插入火焰中烧红，冷却10-15秒。

 

挑取菌落：打开原培养基管口，在火焰旁轻刮斜面菌苔。

 

接种至新培养基：将菌苔转移至液体培养基管壁，轻轻研磨溶解（液体）或划线（固体）。

 

3、收尾处理

 

灼烧工具：接种环再次灭菌，避免污染环境。

 

培养：根据微生物需求设定温度（如37）、时间（如24小时）及需氧条件。

 

二、不同培养基的移种方法

 

三、关键注意事项

 

1、无菌操作

 

操作全程在酒精灯火焰10cm范围内进行，管口/瓶口过火灭菌。

 

避免说话、咳嗽导致气溶胶污染。

 

2、工具处理

 

接种环冷却后再取菌，防止高温杀死微生物。

 

转移后立即灼烧工具，避免残留菌体污染环境。

 

3、特殊微生物处理

 

厌氧菌：使用厌氧罐或穿刺法减少氧气接触。

 

病原菌：在生物安全柜中操作，废弃物高压灭菌。

 

4、标记与记录

 

明确标注菌种名称、日期、培养基类型，避免混淆。

 

记录培养条件（温度、时间、气体环境）及生长现象。

 

四、常见问题及解决

 

污染：若新培养基出现杂菌，检查操作环境或重新灭菌工具。

 

不生长：确认菌种活性、培养基成分及培养条件是否合适。

 

菌苔不均：划线时力度过重或接种环未充分冷却导致菌体死亡。

 

通过规范操作和严格无菌控制，可确保移种成功率及实验结果的可靠性。根据具体实验目的（如扩增、分离或鉴定），选择最适合的移种方法。

 

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