芽孢杆菌的保存方法与注意事项及方法的选择建议！

芽孢杆菌的保存方法因其形成芽孢的特性而具有更强的耐受性，以下为详细保存方案及注意事项：

一、保存方法

1、斜面低温保存法

步骤：将菌种接种于固体斜面培养基，培养至形成芽孢（约24-48小时），4保存。

周期：每3-6个月转接一次，芽孢可延长保存时间至6个月以上。

适用场景：实验室短期保存，操作简便。

2、甘油管冷冻保存法

步骤：将菌液（含芽孢）与20%-30%灭菌甘油混合，分装至冻存管，-80保存。

周期：可保存2-5年。

关键点：建议诱导芽孢形成后保存，提升存活率。

3、沙土管保存法

步骤：

灭菌沙土（河沙:泥土=3:1）与芽孢悬液混合。

真空干燥后密封，4或室温避光保存。

周期：2-5年。

优势：适合无超低温设备时长期保存。

4、冷冻干燥法（冻干）

步骤：芽孢悬液加保护剂（如脱脂牛奶），冷冻干燥后密封。

周期：10年以上，菌种库首选方法。

设备需求：需冻干机，适合专业机构。

二、关键注意事项

无菌操作：全程灭菌处理，避免污染。

芽孢诱导：采用贫营养培养基或高温（80处理10分钟），促进芽孢形成。

生物安全：若为致病菌种，需在生物安全柜操作，遵循实验室安全规程。

复苏方法：冻存菌种需快速解冻（37水浴），沙土管菌种需无菌接种至液体培养基活化。

三、方法选择建议

短期使用：斜面保存，定期转接。

中期研究：甘油管保存，兼顾便利与时长。

长期保藏：冻干或沙土管法，确保遗传稳定性。

通过合理选择方法并严格操作，可有效维持芽孢杆菌的活性和功能，满足不同需求。

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