微生物学实验室培养基的分类与应用场景对比及注意事项!
(2025-07-10 17:25:46)
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微生物学实验室培养基的分类与应用场景对比及注意事项!
百欧博伟生物:微生物学实验室中,保存培养基和增菌培养基是两类关键工具,分别用于长期维持菌种活力和选择性富集目标微生物。以下是它们的分类、用途及特点:
一、保存培养基
(一)目的:长期或短期保存微生物菌种,维持其活力和遗传稳定性。
(二)常见类型及方法:
1、斜面培养基
用途:短期保存(1-3个月)。
特点:琼脂斜面接种后冷藏(4°C),适合细菌和真菌(如营养琼脂、PDA斜面)。
2、半固体穿刺培养基
用途:保存兼性厌氧菌(如大肠杆菌)。
特点:穿刺接种后石蜡封口,减少氧气接触,延长保存时间。
3、甘油保存管
配方:菌悬液与15-30%灭菌甘油混合。
保存条件:-80°C超低温或液氮长期保存(数年)。
4、冷冻干燥(冻干)保存
过程:菌液与保护剂(如脱脂奶)混合后冻干,密封避光保存。
特点:存活期最长(10年以上),但设备成本高。
5、商用菌种保存管
示例:Microbank™(含多孔珠和保存液),-80°C保存。
(三)注意事项:
定期复苏验证菌种活性;
严格无菌操作避免污染;
不同微生物(如嗜盐菌、厌氧菌)需专用保存条件。
二、增菌培养基
目的:选择性促进目标微生物生长,抑制杂菌,用于样本中低浓度病原体的富集。
1、细菌增菌培养基
通用液体培养基:
肉汤类:如普通肉汤(Nutrient Broth)、脑心浸液(BHI)用于广谱增菌。
选择性液体培养基:
SC增菌液:沙门氏菌(含胆盐抑制革兰氏阳性菌)。
TTB(硫代硫酸盐-胆盐-蔗糖肉汤):霍乱弧菌(高pH抑制杂菌)。
EB(碱性蛋白胨水):霍乱弧菌(碱性环境富集)。
李斯特菌增菌肉汤(LEB):含萘啶酮酸抑制革兰氏阴性菌。
2、真菌/酵母增菌培养基
沙氏液体培养基(SDB):广谱真菌增菌(低pH抑制细菌)。
麦芽浸膏肉汤:酵母或丝状真菌富集。
3、其他特殊微生物
厌氧菌增菌:硫乙醇酸盐肉汤(含巯基乙酸钠降低氧化还原电位)。
分枝杆菌:Middlebrook 7H9肉汤(添加油酸-白蛋白-葡萄糖复合物)。
关键特点:
选择性抑制剂:胆盐、抗生素(如万古霉素)、染料(如结晶紫)。
营养强化:添加血液、血清或特定碳源(如甘露醇)。
三、应用场景对比
四、注意事项
保存培养基需定期传代,避免基因变异;
增菌培养基需结合目标微生物特性优化条件(如温度、气体环境);
临床样本增菌后需转种至鉴别培养基进行鉴定。
根据具体实验需求选择合适的培养基类型,可显著提高微生物分离和保存效率。
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